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FITC-D-Lys
FITC-D-Lys 是异硫氰酸荧光素(FITC)与D-型赖氨酸结合形成的小分子荧光探针。D-赖氨酸不被多数天然酶识别,具有较高稳定性。FITC 提供绿色荧光特性(Ex/Em:495/519 nm),可用于标记细胞、细胞壁、菌体、聚合物或用于可视化的生物相互作用研究。因其小分子特性,穿透性强且容易修饰,常用于研究细菌胞壁合成、靶向标记以及探针设计开发。适用于荧光显微、流式细胞术和免疫检测。
名称与基本信息
名称:FITC-D-Lys
中文名称:荧光素标记D-赖氨酸
英文名称:Fluorescein Isothiocyanate-D-Lysine
别名:FITC-D-Lysine、D-Lys(FITC)、D-赖氨酸荧光素偶联物
性状:黄色粉末
结构:
(3)应用:
FITC-D-lys常用于细胞标记、蛋白质定位和追踪、细胞内药物递送、细胞间相互作用研究等。通过将FITC-D-lys与目标分子或细胞结合,可以追踪目标的活动、位置和相互作用,从而研究生物学过程和药物递送等方面的问题。
(4)参考文献
概述:
With the demonstrated intra-microbial accumulation and acidie pH activatable fluoreseence, E.coli and S. aureus labelled with Rox-actam-d-Lys and FiTC-d-Lys were respectively culturedwith Raw 264.7 macrophages in DMEM supplemented with 10% fetal bovine serum. Raw 264.7cell is a mouse leukaemic macrophage phagocyte cell line. Strong FITC signals were identifiedimmediately after addition of dye-labelled bacteria whereas no ROX fluorescence could beobserved (Figure $), which is consistent with the nonfluorescent nature of ROX-lactam-d-Lys atextracellular neutral pH conditions, Intense ROX fluorescence appeared inside host cells after 1-2h ineubation, The bacteria-restricted FiTC and ROX fuorescence within macrophagesvalidates that covalent incorporation of dyes to peptidogly effectively prevents probe leakage
在添加了10%胎牛血清的DMEM中,用Rox-actam-d-Lys和FiTC-d-Lys标记的大肠杆菌和金黄色葡萄球菌分别与Raw 264.7巨噬细胞在微生物内积聚和酸性pH激活的荧光下培养。Raw 264.7cell是一种小鼠白血病巨噬细胞吞噬细胞系。在添加染料标记的细菌后,立即发现了强烈的FITC信号,而没有观察到ROX荧光(图$),这与ROX-内酰胺-d-Lys在细胞外中性pH条件下的非荧光性质是一致的。在1-2小时的插管后,宿主细胞内出现了强烈的ROX荧光。细菌限制了巨噬细胞内的FITC和ROX荧光,验证了共价掺入染料能有效防止探针泄漏
结论:
Phagolysosomal acidity triggered turn-on fluorescence of ROX-lactam anchored onbacterial peptidoglyean. Raw 264.7 cells were respectively incubated in DMEM containing E.coli (A) or S. aureus (B) pre-labelled with ROX-lactam-d-Lys and FITC-d-Lys, and then treatedwith or without BFA. The cells were harvested, resuspended in sodium phosphate buffer of pH4.0 or 7.2, and then visualized by confocal fluorescence microscopy. Bars, 10 um.
hagolysosome的酸性触发了固定在细菌肽碱上的ROX内酰胺的开启荧光。将264.7个原始细胞分别在含有预先标记有ROX-内酰胺-d-Lys和FITC-d-Lys的大肠杆菌(A)或金黄色葡萄球菌(B)的DMEM中孵育,然后用或不用BFA处理。收集细胞,重新悬浮在pH4.0或7.2的磷酸钠缓冲液中,然后通过共聚焦荧光显微镜进行可视化。
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