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CY5.5-Dextran,CY5.5标记葡聚糖,荧光示踪剂在多通道成像系统中的兼容性研究
CY5.5-Dextran 是一种将近红外荧光染料 CY5.5 共价标记于葡聚糖分子上的功能性荧光探针。葡聚糖提供良好的生物相容性、可调分子量及分子渗透性,而 CY5.5 赋予其强荧光、深组织穿透能力和较低的背景干扰,是组织示踪、活体血管成像、屏障完整性检测和肿瘤渗透研究的理想工具。
一、基本信息
中文名:CY5.5-葡聚糖 / CY5.5 荧光标记葡聚糖
英文名:CY5.5-Dextran
别称:远红外葡聚糖、Cyanine 5.5 荧光葡聚糖、红外染料标记葡聚糖
基本结构:以天然多糖葡聚糖(Dextran)为骨架,通过共价键偶联荧光染料 Cyanine 5.5(简称 CY5.5)
二、光学性质
激发波长(λ_ex):675–690 nm
发射波长(λ_em):694–710 nm
荧光颜色:远红外(近红外边缘)
组织穿透力:较高,适合用于小动物活体成像
信噪比:高,组织背景自发荧光干扰少
荧光强度与稳定性:优良,适用于实时长时间成像
相较于可见光荧光探针(如 FITC、CY3),CY5.5-Dextran 可用于深部组织的非侵入式成像和动态渗透性分析,较大提升活体实验的成像质量和分析精度。
三、物化属性
分子量(Dextran 部分):常见为 10 kDa、40 kDa、70 kDa、150 kDa 等多种规格
外观:暗蓝紫色或近黑色粉末
溶解性:高度水溶性,易溶于水、PBS、HEPES、Tris 等缓冲液
连接方式:CY5.5-NHS 酯或 CY5.5-Maleimide 与氨基化葡聚糖反应生成稳定酰胺或硫醚键
稳定性:干燥避光状态下可保存 1–2 年;水溶液建议低温避光短期使用
四、合成方法简述
葡聚糖氨基化:利用氯乙酸、EDA(乙二胺)或其他交联剂在葡聚糖分子上引入 -NH₂ 基团;
标记反应:加入 CY5.5-NHS 酯(或 CY5.5-Mal),在 pH 8.0–8.5 条件下反应 4–12 小时;
纯化:透析(如 3.5–10 kDa MWCO 膜)或凝胶柱层析去除游离染料;
冻干保存:避光保存,制得 CY5.5-Dextran 成品。
五、主要应用领域
活体荧光成像(In Vivo Fluorescence Imaging)
可通过尾静脉注射进入血液系统,实现血管成像、肿瘤定位、药物输运路径分析。
肿瘤血管渗透性评估(EPR 效应)
利用 CY5.5-Dextran 在肿瘤组织中的滞留能力评估药物载体分布和靶向效率。
生理屏障研究
用于研究肠道、肺泡、脑血管屏障(BBB)的通透性变化,如炎症、缺血、药物作用等引起的渗漏。
组织微循环与淋巴示踪
通过不同分子量 CY5.5-Dextran 标记,研究微血管渗漏、淋巴结示踪和组织交换动态。
水凝胶/微载体扩散与释放研究
用作大分子模型探针评估材料孔径与释放特性。
六、优势特点
✅ 近红外边缘发射,信号穿透强、背景低
✅ 葡聚糖骨架生物相容性高,无毒无免疫性
✅ 多种分子量可调,适应不同应用需求
✅ 可用于多模态荧光成像系统(IVIS、LI-COR)
✅ 可定制化标记度,满足科研或临床前研究要求
七、代表性文献与研究实例
Li, Y. et al. Non-invasive imaging of tumor permeability using NIR-labeled dextran probes. Theranostics, 2021, 11(2): 842–857.
→ 使用 CY5.5-Dextran 分析乳腺肿瘤模型的血管渗漏情况。
Wang, Z. et al. Visualization of gut barrier integrity using fluorescent dextran probes. Journal of Biomedical Optics, 2020, 25(9): 095002.
→ 采用 CY5.5-Dextran 研究 DSS 诱导肠炎小鼠模型中肠上皮屏障渗漏。
Zhou, Q. et al. CY5.5-dextran for mapping lymphatic drainage in metastatic tumor models. ACS Biomater. Sci. Eng., 2022, 8(3): 1402–1412.
→ CY5.5-Dextran 用于肿瘤淋巴转移通道可视化示踪。
Chen, X. et al. Assessing pulmonary vascular leak using CY5.5-dextran in LPS-challenged mice. Scientific Reports, 2020, 10, 3239.
→ 使用 CY5.5 荧光葡聚糖检测肺炎模型中肺泡毛细血管渗漏。
八、使用与保存建议
使用浓度:根据实验需求一般为 0.1–5 mg/mL,体内注射浓度约为 1 mg/mL;
溶液保存:4°C 暗处短期保存(< 7 天),长期使用建议每次现配;
干粉保存:–20°C 避光可保存 12–24 个月;
注意事项:避免金属离子、强氧化剂及高温光照对染料造成破坏。
总结
CY5.5-Dextran 是一种适用于近红外荧光成像的葡聚糖类探针,结合了葡聚糖的优良生物相容性和 CY5.5 染料的远红外成像优势,在血管渗漏、组织屏障完整性评估、肿瘤靶向输运和材料扩散性能研究中发挥了重要作用。其低背景、高信噪比的特点使其在活体成像实验中尤为突出。
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