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RB-LPS,罗丹明标记脂多糖的反应条件
罗丹明B标记脂多糖(RB-LPS)是通过化学方法将罗丹明B染料共价偶联到脂多糖分子上的荧光标记物。该过程主要依赖脂多糖分子中的氨基或羟基与罗丹明B活性衍生物发生亲核反应,形成稳定的共价键,实现荧光染料的有效修饰。
反应条件及步骤:
原料准备
脂多糖溶解于适宜的缓冲液(如磷酸盐缓冲液PBS,pH 7.4)中,保证LPS链的稳定和分散。罗丹明B常以其异硫氰酸酯(Rhodamine B isothiocyanate,RBITC)活性形式提供,以促进与LPS官能团的偶联。
反应pH控制
偶联反应通常在弱碱性条件(pH 8.0-9.0)下进行,有利于活性异硫氰酸酯的亲核攻击,同时保护LPS结构的稳定。
反应温度与时间
在室温或轻微加温条件下反应数小时(通常4-12小时),确保反应完全且避免染料水解或非特异性结合。
摩尔比调整
根据所需标记密度,合理调节罗丹明B与脂多糖的摩尔比,避免过度标记导致LPS结构功能改变或荧光淬灭。
纯化步骤
反应结束后,采用透析、凝胶过滤或超滤等技术去除未反应的游离罗丹明B和低分子杂质,确保产物纯度及荧光稳定性。
产品名称:RB-LPS,罗丹明标记脂多糖
纯度:95%+
规格:mg/g
用途:科研
罗丹明B标记脂多糖(RB-LPS)是通过化学方法将罗丹明B染料共价偶联到脂多糖分子上的荧光标记物。该过程主要依赖脂多糖分子中的氨基或羟基与罗丹明B活性衍生物发生亲核反应,形成稳定的共价键,实现荧光染料的有效修饰。
反应条件及步骤:
原料准备
脂多糖溶解于适宜的缓冲液(如磷酸盐缓冲液PBS,pH 7.4)中,保证LPS链的稳定和分散。罗丹明B常以其异硫氰酸酯(Rhodamine B isothiocyanate,RBITC)活性形式提供,以促进与LPS官能团的偶联。
反应pH控制
偶联反应通常在弱碱性条件(pH 8.0-9.0)下进行,有利于活性异硫氰酸酯的亲核攻击,同时保护LPS结构的稳定。
反应温度与时间
在室温或轻微加温条件下反应数小时(通常4-12小时),确保反应完全且避免染料水解或非特异性结合。
摩尔比调整
根据所需标记密度,合理调节罗丹明B与脂多糖的摩尔比,避免过度标记导致LPS结构功能改变或荧光淬灭。
纯化步骤
反应结束后,采用透析、凝胶过滤或超滤等技术去除未反应的游离罗丹明B和低分子杂质,确保产物纯度及荧光稳定性。
产品名称:RB-LPS,罗丹明标记脂多糖
纯度:95%+
规格:mg/g
用途:科研
状态:固体/粉末/溶液
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