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AlexaFluor350 Phalloidin的合成及纯化过程
AlexaFluor350 Phalloidin是菲洛毒素与Alexa Fluor 350染料的共价偶联产物,专用于高分辨率荧光显微镜下神经元细胞骨架F-actin的观察,能够揭示细胞形态与动力学。
合成过程概述:活性染料制备
Alexa Fluor 350以其NHS酯形式提供活性羧基,便于与蛋白质或肽类含有的氨基结合。
菲洛毒素氨基活化
菲洛毒素分子含有可反应的伯胺基团,通常存在于赖氨酸残基侧链,作为NHS酯偶联的位点。
偶联反应
将Alexa Fluor 350 NHS酯在缓冲液(pH 7.4–8.5)中与菲洛毒素混合,常温反应数小时,形成稳定的酰胺键。该过程需在无光条件下进行,以避免染料光降解。
纯化步骤
通过高效液相色谱(HPLC)分离未反应的游离染料和多余反应物,获得纯净的AlexaFluor350 Phalloidin。纯化后的产物以冻干保存,避免水解。
质量确认
采用质谱(MALDI-TOF或ESI-MS)和紫外-可见光谱验证标记成功及染料比例。
应用优势:
该偶联物因其蓝光激发波长(约346 nm)和短波长发射,适合多色成像实验,尤其在神经细胞内复杂骨架结构的动态追踪中发挥重要作用。AlexaFluor350 Phalloidin提供了高灵敏度、低背景的荧光信号,是细胞骨架研究的重要工具。
产品名称:AlexaFluor350 Phalloidin
纯度:95%+
规格:mg/g
用途:科研
状态:固体/粉末/溶液
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sulfo-cy5-nhs
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CAS:2408482-09-5
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