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Alexa Fluor 647 Biotin,AF 647-生物素的反应原理
Alexa Fluor 647 Biotin作为近红外荧光探针,结合了Alexa Fluor 647的光学优势与生物素的高亲和性。其反应原理主要基于NHS酯活性和生物素-亲和素相互作用。
反应原理解析:
NHS酯活性
Alexa Fluor 647 Biotin中的NHS酯基团为亲电性活性酯,易与生物分子(如蛋白质、抗体)上的游离氨基(-NH₂)发生亲核取代反应,生成稳定的酰胺键,实现染料与蛋白质的共价连接。
生物素的高亲和结合
偶联后的生物素部分保持其与亲和素(streptavidin)高亲和力,Kd约10⁻¹⁵ M,使得标记物能通过非共价结合形式与生物素受体牢固结合,实现信号放大和特异识别。
近红外荧光优势
Alexa Fluor 647发射于650-670 nm波段,避免了细胞自身荧光背景的干扰,适合深层组织成像和多色成像。
结合与检测
标记蛋白或抗体与靶分子结合后,通过亲和素-荧光复合物进行信号检测,利用其稳定的荧光发射实现高灵敏度的成像和定量分析。
生物正交性
反应条件温和,兼容活细胞环境,避免对细胞功能的干扰,适合体内外应用。
产品名称:Alexa Fluor 647 Biotin,AF 647-生物素
纯度:95%+
规格:mg/g
用途:科研
Alexa Fluor 647 Biotin作为近红外荧光探针,结合了Alexa Fluor 647的光学优势与生物素的高亲和性。其反应原理主要基于NHS酯活性和生物素-亲和素相互作用。
反应原理解析:
NHS酯活性
Alexa Fluor 647 Biotin中的NHS酯基团为亲电性活性酯,易与生物分子(如蛋白质、抗体)上的游离氨基(-NH₂)发生亲核取代反应,生成稳定的酰胺键,实现染料与蛋白质的共价连接。
生物素的高亲和结合
偶联后的生物素部分保持其与亲和素(streptavidin)高亲和力,Kd约10⁻¹⁵ M,使得标记物能通过非共价结合形式与生物素受体牢固结合,实现信号放大和特异识别。
近红外荧光优势
Alexa Fluor 647发射于650-670 nm波段,避免了细胞自身荧光背景的干扰,适合深层组织成像和多色成像。
结合与检测
标记蛋白或抗体与靶分子结合后,通过亲和素-荧光复合物进行信号检测,利用其稳定的荧光发射实现高灵敏度的成像和定量分析。
生物正交性
反应条件温和,兼容活细胞环境,避免对细胞功能的干扰,适合体内外应用。
产品名称:Alexa Fluor 647 Biotin,AF 647-生物素
纯度:95%+
规格:mg/g
用途:科研
状态:固体/粉末/溶液
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