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NHS-PEG-SS-PEG-NHS的合成方法

时间:2025-07-14 16:48:21       浏览:10
产品名称:NHS-PEG-SS-PEG-NHS的合成方法
合成方法
3.1 合成步骤
PEG-SS-PEG的合成:
试剂:双羟基PEG(HO-PEG-OH)、二硫二吡啶(DSP)、三乙胺(TEA)。
反应:在无水DMF中,HO-PEG-OH与DSP在TEA催化下反应,形成PEG-SS-PEG。
纯化:通过沉淀(乙醚)或透析(MWCO 1 kDa)去除未反应试剂。
NHS活化:
试剂:PEG-SS-PEG、NHS、EDC(1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺)。
反应:在MES缓冲液(pH 5.0)中,EDC/NHS活化PEG的羧基,形成NHS酯。
纯化:通过高效液相色谱(HPLC)或透析(MWCO 1 kDa)去除未反应试剂。
表征:
质谱(MS):确认分子量(理论值与实际值±0.5%)。
核磁共振(¹H NMR):验证PEG的亚甲基信号(δ 3.5-3.8 ppm)和二硫键的特征峰(δ 2.5-3.0 ppm)。
3.2 典型反应示例
蛋白质交联:
步骤:将NHS-PEG-SS-PEG-NHS(5 mM)与蛋白质(1 mg/mL)在MES缓冲液(pH 5.0)中混合,室温反应2小时。
纯化:通过透析或脱盐柱去除未结合的交联剂。
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