产品名称：iRGD-PEG-CY5的合成方法
合成方法
iRGD-PEG-CY5 的制备
步骤1：iRGD多肽合成
通过 固相多肽合成（SPPS） 技术合成CRGDKGPDC序列，C端为半胱氨酸（Cys），N端为乙酰化修饰。
步骤2：PEG连接臂引入
方法A：氨基反应
将 iRGD多肽 的N端氨基与 PEG4-NHS酯 在pH 7.4的PBS缓冲液中反应，生成 iRGD-PEG4-COOH。
方法B：巯基反应
若iRGD多肽含半胱氨酸（Cys），可通过 马来酰亚胺-PEG4-NHS酯 与Cys的巯基反应，生成 iRGD-PEG4-Mal。
步骤3：CY5荧光标记
方法A：氨基标记
将 iRGD-PEG4-COOH 的羧酸端与 CY5-NHS酯 在EDC/NHS催化下反应，生成 iRGD-PEG4-CY5。
方法B：巯基标记
将 iRGD-PEG4-Mal 的马来酰亚胺基团与 CY5-SH（含巯基的CY5衍生物）在pH 6.5的PBS中反应，生成 iRGD-PEG4-CY5。
纯化：
通过高效液相色谱（HPLC）或半制备型凝胶过滤层析（如Sephadex G-25）去除未反应原料，产物纯度＞95%。
表征与验证
质谱（MS）：确认分子量（iRGD多肽分子量约1.2 kDa，PEG4约0.2 kDa，CY5约0.7 kDa，总分子量约2.1 kDa）。
荧光光谱：验证CY5的激发（649 nm）与发射（670 nm）波长。
细胞实验：通过共聚焦显微镜观察iRGD-PEG-CY5在肿瘤细胞（如MDA-MB-231）中的内吞及荧光信号。
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