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ICG-cRGD,吲哚菁绿-环肽的表征与验证

时间:2025-07-17 18:31:00       浏览:3
产品名称:ICG-cRGD,吲哚菁绿-环肽的表征与验证
合成方法
ICG-cRGD 的制备
步骤1:cRGD肽合成
通过 固相多肽合成(SPPS) 技术合成环状RGDfC序列,C端为半胱氨酸(Cys),N端为乙酰化修饰。
步骤2:ICG标记
方法A:氨基反应
将 cRGD肽 的N端氨基与 ICG-NHS酯 在pH 7.4的PBS缓冲液中反应,生成 ICG-cRGD。
方法B:巯基反应
若cRGD肽含半胱氨酸(Cys),可通过 马来酰亚胺-ICG 与Cys的巯基反应,生成 ICG-cRGD。
纯化:
通过高效液相色谱(HPLC)或半制备型凝胶过滤层析(如Sephadex G-25)去除未反应原料,产物纯度>95%。
表征与验证
质谱(MS):确认分子量(cRGD肽分子量约0.6 kDa,ICG约0.77 kDa,总分子量约1.37 kDa)。
荧光光谱:验证ICG的激发(780 nm)与发射(805 nm)波长。
细胞实验:通过共聚焦显微镜观察ICG-cRGD在整合素阳性细胞(如U87胶质瘤细胞)中的内吞及荧光信号。
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