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CY3.5-PyruvicAcid,CY3.5丙酮酸的反应条件
CY3.5标记丙酮酸(CY3.5-Pyruvic Acid)是一种通过化学修饰将荧光染料Cy3.5与丙酮酸分子结合的探针分子,用于研究丙酮酸的代谢行为、酶反应路径和代谢示踪。由于丙酮酸是一种小、结构简单且高反应活性的分子,其标记过程须在严格控制条件下进行,以保持其羧酸与酮基活性。
1. 结构活性及反应位点选择
丙酮酸含有一个羧基和一个酮基。在标记反应中,优先选择羧基为反应点进行修饰(如通过酯化、酰胺化反应引入功能团),以保留酮基作为代谢反应核心。通常需先引入氨基接头,例如通过氨基乙醇等中间体。
2. 染料形式与活化条件
Cy3.5-NHS酯为常用活化形式,适合与伯胺反应生成酰胺键。需在弱碱性条件(pH 7.58.5)下使用,以维持NHS酯活性和氨基亲核性,反应一般持续24小时。
3. 偶联中间体制备
先将丙酮酸羧基通过EDC/NHS活化生成酯中间体,引入亲核氨基(如胺基修饰PEG链或氨基多糖),形成稳定的氨基化丙酮酸。再用Cy3.5-NHS酯进行荧光标记。
4. 控制条件要求
需在无金属离子体系中进行,避免催化副反应;
全程避光操作,防止Cy3.5荧光团降解;
使用冷却或室温操作以避免丙酮酸降解;
反应体系常加入DMSO或DMF作为助溶剂,提高溶解度与反应效率。
5. 纯化与鉴定
反应后通过反相HPLC分离产物,质谱检测确认目标分子;UV-Vis吸收确认Cy3.5峰(约570 nm);同时检测丙酮酸衍生基团保留程度。
产品名称:CY3.5-PyruvicAcid
纯度:95%+
规格:mg/g
用途:科研
CY3.5标记丙酮酸(CY3.5-Pyruvic Acid)是一种通过化学修饰将荧光染料Cy3.5与丙酮酸分子结合的探针分子,用于研究丙酮酸的代谢行为、酶反应路径和代谢示踪。由于丙酮酸是一种小、结构简单且高反应活性的分子,其标记过程须在严格控制条件下进行,以保持其羧酸与酮基活性。
1. 结构活性及反应位点选择
丙酮酸含有一个羧基和一个酮基。在标记反应中,优先选择羧基为反应点进行修饰(如通过酯化、酰胺化反应引入功能团),以保留酮基作为代谢反应核心。通常需先引入氨基接头,例如通过氨基乙醇等中间体。
2. 染料形式与活化条件
Cy3.5-NHS酯为常用活化形式,适合与伯胺反应生成酰胺键。需在弱碱性条件(pH 7.58.5)下使用,以维持NHS酯活性和氨基亲核性,反应一般持续24小时。
3. 偶联中间体制备
先将丙酮酸羧基通过EDC/NHS活化生成酯中间体,引入亲核氨基(如胺基修饰PEG链或氨基多糖),形成稳定的氨基化丙酮酸。再用Cy3.5-NHS酯进行荧光标记。
4. 控制条件要求
需在无金属离子体系中进行,避免催化副反应;
全程避光操作,防止Cy3.5荧光团降解;
使用冷却或室温操作以避免丙酮酸降解;
反应体系常加入DMSO或DMF作为助溶剂,提高溶解度与反应效率。
5. 纯化与鉴定
反应后通过反相HPLC分离产物,质谱检测确认目标分子;UV-Vis吸收确认Cy3.5峰(约570 nm);同时检测丙酮酸衍生基团保留程度。
产品名称:CY3.5-PyruvicAcid
纯度:95%+
规格:mg/g
用途:科研
状态:固体/粉末/溶液
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