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CoroNa Green, AM是一种细胞膜透过型钠离子(Na⁺)荧光指示探针,广泛用于监测活细胞内钠离子浓度变化。其分子基于CoroNa Green活性染料,通过乙酰氧甲基(Acetoxymethyl,AM)酯化修饰,增强细胞膜穿透性。进入细胞后,细胞内酯酶水解AM酯基,释放出亲水性的活性探针,实现细胞内钠离子信号的荧光检测。
工作原理
细胞膜穿透
AM酯基团赋予探针疏水性,使其可无阻碍穿透细胞膜进入细胞质。
酯酶水解
细胞内酯酶作用去除AM酯,生成带电荷的活性CoroNa Green,滞留于细胞内部。
钠离子结合及荧光响应
活性染料与钠离子结合后分子构象发生变化,引起荧光信号增强,荧光强度与钠离子浓度成正比。
使用注意事项
溶解与储存
用无水DMSO溶解储备液,避光保存于-20℃,避免反复冻融。
染色条件
一般将探针稀释后加入培养细胞中,37℃孵育30-60分钟。
荧光检测设备
需配备适合492 nm激发、516 nm发射的荧光显微镜、酶标仪或流式细胞仪。
注意事项
染色时间及浓度需根据细胞类型优化,避免细胞毒性。
长时间光照可能导致光漂白,影响信号稳定性。
探针对其他离子干扰较小,但实验设计时应考虑环境因素。
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