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CY3-T7,花菁染料CY3标记T7多肽的反应机制

时间:2025-07-28 15:17:23       浏览:13
CY3-T7,花菁染料CY3标记T7多肽的反应机制
CY3-T7是利用花菁染料Cyanine 3(CY3)标记T7多肽形成的荧光探针。T7多肽是由7个氨基酸组成的小肽链,常用于细胞穿膜和分子识别。标记过程依赖于CY3活性基团与多肽官能团的化学反应。
反应机制:
活性酯反应
CY3通常以NHS酯形式存在,活性酯具有高亲核性,能与多肽链中赖氨酸残基的ε-氨基或多肽N末端的游离氨基发生亲核加成反应。
酰胺键形成
多肽氨基作为亲核试剂攻击CY3-NHS酯中的羰基碳,生成过渡态,随后释放N-羟基琥珀酰亚胺,形成稳定的酰胺键,实现染料与多肽的共价结合。
反应条件调控
反应通常在pH 7.5-8.5的缓冲液中进行,pH控制使氨基部分解离为自由碱基,提高反应速率,且避免蛋白质结构破坏。
选择性与特异性
赖氨酸残基是反应主要位点,因其氨基较为活泼。标记过程可通过调节染料与多肽摩尔比控制标记密度,防止过度修饰。
反应动力学
反应速率快,常温下完成于1-4小时内,伴随荧光信号逐渐增强。
副反应与控制
反应环境需避光和避免强氧化剂,防止染料降解和非特异性反应。
产物稳定性
形成的酰胺键稳定,标记的多肽在生物体系中表现良好的荧光稳定性和生物活性。
纯化与验证
反应后通过色谱纯化,利用质谱和光谱确认标记成功及结构完整性。
产品名称:CY3-T7,花菁染料CY3标记T7多肽
纯度:95%+
规格:mg/g
用途:科研

状态:固体/粉末/溶液


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