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Cy3-Alpha-Bungarotoxin,Cy3标记a-银环蛇毒素的合成过程研究

时间:2025-07-29 10:11:21       浏览:24
Cy3-Alpha-Bungarotoxin,Cy3标记a-银环蛇毒素的合成过程研究
Cy3-Alpha-Bungarotoxin 是一种将荧光染料 Cy3 共价结合至 α-银环蛇素(Alpha-Bungarotoxin, α-BTX)上的生物探针,用于神经生物学研究,特别是神经肌肉接头处乙酰胆碱受体(nAChR)的可视化。α-BTX 是一种来自银环蛇液的多肽素,具有高度特异性地 nAChR 的结合能力。其分子量约为8000 Da,含有多个赖氨酸残基,是荧光标记的理想位点。Cy3 是一种三甲基花青染料,发射波长约为570 nm,具有良好的光稳定性和亮度。
合成过程通常采用 NHS 酯活化的 Cy3 染料(如 Cy3-NHS ester)与 α-BTX 的伯胺(-NH2)基团进行亲核取代反应。首先将α-BTX溶解于适当的缓冲液中(如0.1 M 碳酸盐缓冲液,pH 8.3),以确保赖氨酸残基处于脱质子状态。然后将 Cy3-NHS ester 溶解于DMSO或DMF中滴加至蛋白溶液中,在避光条件下反应1–2小时。反应完成后使用凝胶渗透色谱(如 Sephadex G-25)或超滤法除去游离的未反应染料。
标记后的Cy3-α-BTX 保留其高亲和力结合活性,可以特异性结合乙酰胆碱受体并用于荧光显微成像。反应过程中,为避免过度标记影响其功能,常通过控制Cy3与蛋白的摩尔比(如1:1至3:1)实现适度标记。质谱和UV-Vis光谱可用于验证标记程度与纯度。此类荧光素探针在神经网络成像、膜蛋白定位以及神经突触识别中具有重要。
产品名称:Cy3-Alpha-Bungarotoxin
纯度:95%+
规格:mg/g
用途:科研

状态:固体/粉末/溶液


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