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BODIPY TMR NHS 活化酯是一种基于 BODIPY(硼二吡咯亚甲基)核心结构的红橙色荧光染料,其末端连接有 NHS 酯(N-Hydroxysuccinimide ester)活性基团,能与伯胺(–NH₂)基团高效共价结合。TMR 是 Tetramethylrhodamine 的缩写,BODIPY TMR 染料结构融合了 TMR 的光谱特性和 BODIPY 的化学稳定性,使其成为一种理想的蛋白质、抗体、核酸和小分子偶联标记试剂。
反应活性与偶联原理
NHS 活性酯能与含伯胺基团的分子高效偶联,反应机理为:
NHS 酯与蛋白质、肽链或其他含有 –NH₂ 的分子在碱性条件(pH 7.5–8.5)下发生酰胺化反应;
反应条件温和,通常室温或 4°C 下反应 30–60 分钟;
产物为 BODIPY TMR 标记的目标分子,具有高度稳定的荧光性能。
适配对象包括:
蛋白质(如 IgG、BSA、Streptavidin);
抗体、酶;
胺化核酸;
多肽或小分子药物;
表面修饰粒子(如胺化纳米颗粒、磁珠)等。

应用领域
BODIPY TMR NHS 活化酯广泛用于生命科学与生物分析等多个领域,尤其适合多色荧光实验:
1. 荧光标记蛋白质与抗体
通过 NHS 酯标记蛋白质赖氨酸残基,形成稳定的荧光探针,用于免疫荧光(IF)、流式细胞术(FACS)、荧光原位杂交(FISH)等。
2. 细胞成像与追踪
标记靶向分子,实现高分辨率共聚焦荧光成像,用于活细胞膜标记、胞器追踪、细胞活力检测等。
3. 高通量筛选
作为明亮的红橙色探针,在 ELISA、高内涵筛选(HCS)、FRET 等系统中用于信号放大。
4. 荧光共振能量转移(FRET)
与绿色激发染料(如 Alexa Fluor 488)组成 FRET 对,用于生物分子相互作用检测和构象变化研究。
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