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Tide Quencher 1 马来酰亚胺(TQ1 Maleimide)是一种高效、稳定的荧光淬灭剂分子,广泛应用于荧光探针的设计、FRET(荧光共振能量转移)实验、分子成像、实时荧光PCR(qPCR)以及其他生物检测技术。
功能与机制
TQ1 本身不发射荧光,而是能高效吸收特定波长的激发能量并通过非辐射过程释放能量,因此可作为高效的能量接受者,尤其适用于短波长(如Cy3、Alexa Fluor 488、FAM等)荧光团的淬灭。通过Förster 能量转移(FRET)或静态淬灭机制,TQ1 能显著降低荧光团发光,从而用于构建“开/关”型荧光探针。
马来酰亚胺反应特性
TQ1 马来酰亚胺通过其反应性马来酰亚胺基团,与巯基(-SH)发生Michael加成反应,形成稳定的硫醚键。这种反应具有高度专一性和温和的反应条件,适用于以下用途:
巯基蛋白质修饰:如Cys-残基选择性标记
抗体偶联:实现FRET探针或淬灭型免疫标记物
寡核苷酸标记:与巯基修饰的寡聚DNA或RNA偶联
荧光分子探针构建:如酶底物、裂解探针或传感器
应用
1. 荧光探针构建
TQ1 可与近端的荧光团配对,设计为“分子开关”式探针。在未发生生物反应时,TQ1与荧光团距离接近,导致荧光淬灭;一旦特定酶或靶分子作用,TQ1与荧光团分离,荧光释放,从而实现生物活性监测。
2. 实时荧光PCR(qPCR)
在TaqMan探针中,TQ1常作为3端淬灭剂,配对FAM、HEX等荧光团。探针被核酸酶切割时,荧光团与TQ1分离,荧光信号增强,从而监测DNA扩增过程。
3. 生物成像
可用于构建可控荧光标记物,标记细胞表面受体、酶、信号通路等目标,在成像过程中提高信噪比,减少背景干扰。
4. 蛋白质-蛋白质相互作用检测
与荧光团偶联的另一分子配对,检测蛋白质结合与解离,通过FRET或淬灭恢复变化反映相互作用状态。
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DPPE-Maleimide(CAS号:1633047-04-7)
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