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CY3标记的甘露糖 Cy3-mannose的纯化与表征
CY3标记的甘露糖(Cy3-Mannose)是一种由单糖分子甘露糖与花青类荧光染料CY3共价偶联形成的荧光糖探针,常用于研究糖类与蛋白质之间的分子识别、细胞膜糖类分布、以及多糖衍生物的构建等方向。甘露糖是一种六碳单糖,其在分子结构上含有多个羟基基团,可通过特定的化学改性引入活性位点,实现荧光染料的定向标记。将CY3与甘露糖结合后,不仅保留了糖类的化学识别能力,还具备了荧光成像与示踪功能,适用于多种生物与化学实验体系。
在合成CY3-Mannose之前,需对甘露糖进行预修饰,通常采用还原端修饰法或引入氨基链接头。例如,可在甘露糖还原端通过还原胺化反应引入氨基功能团,为与CY3-NHS酯的反应提供条件。随后,将CY3-NHS酯溶解于无水DMSO中,并在缓冲液(pH 8.3,碳酸氢钠缓冲体系)中与氨基甘露糖反应。反应过程通常在避光、室温条件下进行1–2小时。
完成标记反应后,需将产物进行纯化以去除未反应的游离染料和其他小分子副产物。常用的纯化方法包括透析(使用截留分子量合适的膜,如1 kDa)或凝胶渗透层析(G-10或G-25 Sephadex)。纯化后的样品可以通过冻干保存,或溶于缓冲液中避光低温储存。
表征CY3-Mannose的方法主要包括以下几类:
紫外-可见光谱分析:通过检测在550–570 nm波段的吸收峰确认CY3的存在,同时在280 nm附近测定糖的部分紫外吸收,用以计算标记度。
荧光光谱:激发波长设定在550 nm,检测发射峰是否位于570 nm左右,以评估荧光强度与信号稳定性。
高效液相色谱(HPLC):通过反相或亲水相互作用色谱法分析样品纯度及组分组成。
产品名称:CY3标记的甘露糖 Cy3-mannose
纯度:95%+
规格:mg/g
用途:科研
CY3标记的甘露糖(Cy3-Mannose)是一种由单糖分子甘露糖与花青类荧光染料CY3共价偶联形成的荧光糖探针,常用于研究糖类与蛋白质之间的分子识别、细胞膜糖类分布、以及多糖衍生物的构建等方向。甘露糖是一种六碳单糖,其在分子结构上含有多个羟基基团,可通过特定的化学改性引入活性位点,实现荧光染料的定向标记。将CY3与甘露糖结合后,不仅保留了糖类的化学识别能力,还具备了荧光成像与示踪功能,适用于多种生物与化学实验体系。
在合成CY3-Mannose之前,需对甘露糖进行预修饰,通常采用还原端修饰法或引入氨基链接头。例如,可在甘露糖还原端通过还原胺化反应引入氨基功能团,为与CY3-NHS酯的反应提供条件。随后,将CY3-NHS酯溶解于无水DMSO中,并在缓冲液(pH 8.3,碳酸氢钠缓冲体系)中与氨基甘露糖反应。反应过程通常在避光、室温条件下进行1–2小时。
完成标记反应后,需将产物进行纯化以去除未反应的游离染料和其他小分子副产物。常用的纯化方法包括透析(使用截留分子量合适的膜,如1 kDa)或凝胶渗透层析(G-10或G-25 Sephadex)。纯化后的样品可以通过冻干保存,或溶于缓冲液中避光低温储存。
表征CY3-Mannose的方法主要包括以下几类:
紫外-可见光谱分析:通过检测在550–570 nm波段的吸收峰确认CY3的存在,同时在280 nm附近测定糖的部分紫外吸收,用以计算标记度。
荧光光谱:激发波长设定在550 nm,检测发射峰是否位于570 nm左右,以评估荧光强度与信号稳定性。
高效液相色谱(HPLC):通过反相或亲水相互作用色谱法分析样品纯度及组分组成。
产品名称:CY3标记的甘露糖 Cy3-mannose
纯度:95%+
规格:mg/g
用途:科研
状态:固体/粉末/溶液
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