CY3标记的核组蛋白 CY3-Nucleohistone的反应机制
CY3标记的核组蛋白（Cy3-Nucleohistone）是一种通过将荧光染料CY3共价连接于核组蛋白上的荧光标记蛋白复合物。核组蛋白作为染色质的主要结构蛋白，富含赖氨酸等含氨基的残基，适合作为荧光染料偶联的位点。CY3染料是一种活性较强的NHS酯型花青类染料，能够高效且选择性地与蛋白质上的伯胺基团反应，实现稳定的共价偶联。
标记过程的核心反应机制为NHS酯的酰胺化反应。CY3-NHS酯在适宜的缓冲条件（pH约8.0–8.5）下，NHS酯中的活泼酯基被核组蛋白中赖氨酸侧链上的自由伯胺基亲核攻击，形成酰胺键，同时释放N-羟基琥珀酰亚胺（NHS）作为离去基团。该反应属于亲核取代反应，具有较高的选择性与反应效率。
在实际反应中，核组蛋白通常溶解于碳酸氢钠缓冲液中，调节pH确保伯胺基处于非质子化形式以增强亲核性。加入CY3-NHS酯后，反应体系需避光并在室温下温和搅拌1–2小时。该条件有助于确保染料分子与蛋白质充分结合，同时避免染料水解或蛋白质变性。
反应的化学机理如下：CY3-NHS酯中的碳酰基碳原子被核组蛋白赖氨酸氨基的孤对电子攻击，形成四面体中间体，随后NHS作为良好的离去基团脱离，生成稳定的酰胺键连接结构。该共价键赋予标记蛋白强的稳定性，不易被水解破坏。
标记过程中需注意染料与蛋白比例控制，避免过量染料导致蛋白构象改变或荧光猝灭。此外，反应结束后常采用透析、凝胶过滤或超滤等纯化手段，去除游离染料和副产物，确保产物的纯度和功能性。
整体而言，CY3标记核组蛋白的反应机制基于高效的NHS酯-伯胺酰胺化反应，通过合理的反应条件控制，实现染料与蛋白质的稳定偶联，为后续染色质结构研究、蛋白定位及动态成像提供可靠的荧光标记工具。
产品名称：CY3标记的核组蛋白 CY3-Nucleohistone
纯度：95%+
规格：mg/g
用途：科研

状态：固体/粉末/溶液

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仅用于科研，不能用于人体。小编axc