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Tide Quencher 2WS NHS Ester的结构主要包括三部分:
淬灭核心(Tide Quencher 2)
专为中等波长的荧光染料(发射波长500–580 nm)设计,能够有效淬灭如FAM、TET、JOE、Cy3、Alexa Fluor 488等常见荧光染料。
“WS”水溶性修饰
通过在分子结构中引入亲水基团(如磺酸盐、PEG等),提升其在水性体系中的溶解性,适合生物体系中直接使用,无需有机助溶剂。
琥珀酰亚胺酯活性基团(NHS Ester)
该官能团是对伯胺(-NH₂)高度活性的酰化剂,在温和条件下可与蛋白质、寡核苷酸或其他生物分子上的氨基共价连接,形成稳定的酰胺键。该反应通常在pH 7.2–8.5范围内高效进行。

应用领域
1. 荧光探针设计
Tide Quencher 2WS NHS Ester常用于构建双标记探针,如分子信标(Molecular Beacons)、TaqMan探针等,用于荧光PCR、实时荧光成像、核酸杂交等检测技术。
2. 蛋白质和抗体标记
NHS酯可与蛋白质上的赖氨酸残基共价结合,实现荧光淬灭剂对生物大分子的标记。标记后可用于检测蛋白构象变化、相互作用或酶反应。
3. FRET系统构建
作为FRET系统中的受体端,与绿色系荧光染料配对,可用于研究分子间距变化、相互作用动力学、生物传感等。
4. 细胞成像与生物检测
构建的淬灭探针在未激活状态下无荧光信号,避免背景干扰,信号转导清晰,适用于细胞内靶向成像或实时监测。
使用与操作建议
偶联条件:建议在pH 7.4–8.5的缓冲液中反应,如PBS或碳酸盐缓冲液;
溶解方式:推荐使用无水DMSO或DMF作为初始溶剂,再稀释至目标缓冲液;
反应时间:通常在室温下30分钟至1小时即可完成标记;
储存条件:干燥、避光、-20°C保存,避免频繁开封和湿气
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