产品名称：CY5-arginine，CY5-精氨酸的合成方法
一、合成方法
1. 原料准备
CY5-NHS 酯：近红外荧光染料，提供活性酯基团用于偶联。
L-精氨酸：生物活性形式的精氨酸，含游离 ε-氨基。
催化剂：1-乙基-3-(3-二甲基氨丙基)碳二亚胺（EDC） 和 N-羟基琥珀酰亚胺（NHS），用于活化羧基并促进氨基反应。
溶剂：无水 DMF 或 DMSO，确保反应在无水条件下进行。
2. 反应步骤
步骤一：将 CY5-NHS 酯溶解于无水溶剂，加入 EDC 和 NHS，室温下活化 30 分钟，形成活性中间体。
步骤二：加入 L-精氨酸，继续反应 2-4 小时，确保氨基与活性酯完全偶联。
步骤三：通过 透析（MWCO 1000-3000 Da） 或 凝胶过滤（如 Sephadex G-25 柱） 去除未反应的 CY5 和副产物。
步骤四：通过 高效液相色谱（HPLC） 或 薄层色谱（TLC） 确认纯度，并利用 质谱（MS） 和 紫外-可见光谱 验证结构。
3. 产物表征
荧光特性：CY5 的特征吸收峰（650 nm）和发射峰（670 nm）需明显，且标记后荧光强度无显著下降。
氨基消耗：通过 TNBS 法 或 荧光胺法 检测精氨酸 ε-氨基的消耗量，确认偶联效率（通常 >90%）。
纯度：HPLC 分析显示单一主峰，无游离 CY5 或未反应精氨酸残留。
二、物理化学性质
1. 溶解性
水溶性：CY5-精氨酸具有良好的水溶性（>5 mg/mL），因 PEG 或精氨酸的极性基团。
有机溶剂兼容性：可溶于 DMF、DMSO 等极性溶剂，便于化学修饰或与脂质体复合。
2. 稳定性
光稳定性：CY5 在近红外区域的光漂白速率较低，适合长时间成像（如活体追踪）。
化学稳定性：在生理条件（pH 7.4，37℃）下，酰胺键稳定，但需避光保存以防止荧光淬灭。
热稳定性：在 4℃ 或 -20℃ 下可长期保存（>6 个月），无显著降解。
3. 反应活性
胍基保留：精氨酸的胍基在偶联后仍保持活性，可与 阳离子氨基酸转运体（CAT-1） 结合，实现细胞摄取。
荧光标记效率：每个精氨酸分子通常标记 1-2 个 CY5 分子，避免空间位阻影响荧光信号。
温馨提示：仅用于科研，不能用于人体实验！wyh


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