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CY3-Biotin,CY3标记生物素的反应原理
CY3-Biotin是将荧光染料CY3通过共价键与生物素分子结合形成的标记物。生物素是一种小分子维生素,具有独特的酰亚胺结构和可与亲和素类蛋白高亲和力结合的特性。CY3标记生物素使其既具备强烈的荧光信号,又保持了生物素的高选择性结合能力,应用于生物标记和分子检测领域。
其反应原理主要基于CY3染料的活性基团与生物素分子中的功能基团形成共价结合。常用的CY3活性衍生物为NHS酯(N-羟基琥珀酰亚胺酯),该活性基团可与生物素的游离氨基发生酰胺化反应。具体过程为CY3-NHS酯的羰基碳原子被生物素氨基的亲核氮原子攻击,形成四面体过渡态,中间释放出NHS离子,终形成稳定的酰胺键。
该反应在温和的缓冲环境中进行,pH一般控制在7.5至8.5范围,以保证氨基的适当活性及染料的稳定性。反应温度通常为室温,时间根据试剂浓度和反应体系从几小时到一昼夜不等。
此外,生物素结构中还含有多个活性位点,染料的偶联需选择性地与特定氨基结合,避免影响生物素与亲和素的结合区域。通常通过反应条件调控和纯化步骤确保标记的特异性和功能性。
完成反应后,通过透析、层析等方法去除未反应的游离染料,获得高纯度的CY3-Biotin。该复合物既保留了生物素与亲和素的高亲和力结合能力,又具备CY3的优良光学性能,为多样的生物检测和标记提供了有效的工具。
产品名称:CY3-Biotin
纯度:95%+
规格:mg/g
用途:科研
CY3-Biotin是将荧光染料CY3通过共价键与生物素分子结合形成的标记物。生物素是一种小分子维生素,具有独特的酰亚胺结构和可与亲和素类蛋白高亲和力结合的特性。CY3标记生物素使其既具备强烈的荧光信号,又保持了生物素的高选择性结合能力,应用于生物标记和分子检测领域。
其反应原理主要基于CY3染料的活性基团与生物素分子中的功能基团形成共价结合。常用的CY3活性衍生物为NHS酯(N-羟基琥珀酰亚胺酯),该活性基团可与生物素的游离氨基发生酰胺化反应。具体过程为CY3-NHS酯的羰基碳原子被生物素氨基的亲核氮原子攻击,形成四面体过渡态,中间释放出NHS离子,终形成稳定的酰胺键。
该反应在温和的缓冲环境中进行,pH一般控制在7.5至8.5范围,以保证氨基的适当活性及染料的稳定性。反应温度通常为室温,时间根据试剂浓度和反应体系从几小时到一昼夜不等。
此外,生物素结构中还含有多个活性位点,染料的偶联需选择性地与特定氨基结合,避免影响生物素与亲和素的结合区域。通常通过反应条件调控和纯化步骤确保标记的特异性和功能性。
完成反应后,通过透析、层析等方法去除未反应的游离染料,获得高纯度的CY3-Biotin。该复合物既保留了生物素与亲和素的高亲和力结合能力,又具备CY3的优良光学性能,为多样的生物检测和标记提供了有效的工具。
产品名称:CY3-Biotin
纯度:95%+
规格:mg/g
用途:科研
状态:固体/粉末/溶液
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