Cy3-Shrimp-tropomyosin，CY3标记虾原肌球蛋白的合成步骤
CY3标记虾原肌球蛋白是一种通过共价偶联技术将荧光染料Cy3标记于虾类来源的原肌球蛋白蛋白质上的过程。该过程旨在结合蛋白的特异性结构与Cy3的优良荧光性能，为后续的生物化学分析提供直观的荧光标记物。
合成步骤通常包括以下几个关键环节：
蛋白质制备
首先，获得高纯度的虾原肌球蛋白。该蛋白质可通过组织匀浆、盐析和层析技术提纯，确保样品中蛋白浓度和纯度适合后续标记反应。纯化后蛋白应溶解于适宜的缓冲液中（通常为PBS或碳酸盐缓冲液），pH保持在7.5至8.5范围内，以利于酰胺键形成。
Cy3染料的准备
使用带有活性NHS酯基团的Cy3染料，该活性基团能与蛋白中的游离氨基发生高效的共价结合。Cy3-NHS酯需溶解于有机溶剂（如DMF或DMSO）中，制成一定浓度的储备液，且需避免光照保存。
偶联反应
将Cy3-NHS酯缓慢加入到蛋白溶液中，控制染料与蛋白的摩尔比以防止过度标记导致蛋白功能受损。反应体系通常维持在室温或4℃，反应时间一般为数小时至一昼夜，期间避免强光直射以保护染料活性。
终止与纯化
反应结束后，通过透析、凝胶过滤或柱层析等方法，去除未反应的游离Cy3染料和低分子杂质，获得纯净的Cy3-标记虾原肌球蛋白。纯化后的蛋白样品应储存在避光、低温条件下，防止荧光衰减。
验证与表征
利用紫外-可见光谱和荧光光谱确认标记效率及荧光性质。SDS-PAGE联合荧光扫描用于检测标记蛋白的完整性及纯度。可通过质谱或毛细管电泳进一步分析分子量和标记程度。
产品名称：Cy3-Shrimp-tropomyosin
纯度：95%+
规格：mg/g
用途：科研

状态：固体/粉末/溶液

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仅用于科研，不能用于人体。小编axc