产品名称：ATPPLPR-CY5的制备方法
一、ATPPLPR-CY5 的特性
荧光标记功能：
CY5 的强荧光信号允许高灵敏度检测，适用于活细胞成像、体内光学成像及流式细胞术。
近红外发射波长可穿透较深组织（如数毫米），适用于小动物整体成像或临床术中导航。
靶向性（需验证）：
若 ATPPLPR 设计为靶向特定受体（如肿瘤相关抗原、血管内皮生长因子受体），则 ATPPLPR-CY5 可特异性富集于靶组织，实现精准成像。
需通过体外结合实验（如 ELISA、SPR）或体内成像验证其靶向效率。
稳定性与生物相容性：
共价连接确保 CY5 在体内循环中不易脱落，减少背景信号。
短肽的低免疫原性降低体内应用风险，但需评估长期毒性。
二、ATPPLPR-CY5 的制备方法
短肽合成：
固相合成法（SPPS）：
使用 Fmoc 或 Boc 保护策略，逐步延伸肽链至 ATPPLPR。
若需引入巯基修饰位点，可在序列中加入半胱氨酸（Cys）。
纯化与鉴定：
反相高效液相色谱（RP-HPLC）纯化，质谱（MS）确认分子量。
检测巯基活性（如使用 Ellman 试剂，若含 Cys）。
CY5 标记：
反应条件：
NHS 酯法：将 CY5-NHS 溶于 DMF 或 DMSO，与短肽（溶于 PBS 或碳酸盐缓冲液，pH 7.5-8.5）混合，室温反应 1-2 小时。
马来酰亚胺法：若短肽含 Cys，使用 CY5-马来酰亚胺在 pH 6.5-7.5 下反应，避免巯基氧化。
纯化：
透析或超滤去除未反应的 CY5，RP-HPLC 进一步纯化标记产物。
通过荧光光谱和 HPLC 确认标记效率（通常 >90%）。
温馨提示：仅用于科研，不能用于人体实验！wyh


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