常用名 5-荧光素氨基磷酸酯

英文名 6-FAM phosphoramidite

CAS号 204697-37-0

分子量 843.94100

分子式 C46H58N3O10P

熔点 N/A

功能与应用
寡核苷酸标记
FAM通过其5-氨基磷酸酯修饰，实现对DNA或RNA探针的共价标记，用于荧光检测，增强分子的可视化和定量能力。

荧光定量PCR（qPCR）
FAM标记的探针是实时定量PCR中最常用的荧光报告基团，能有效反映扩增产物的量，支持高灵敏度和高特异性的核酸检测。

分子杂交与原位检测
在荧光原位杂交（FISH）等技术中，FAM标记的探针用于定位特定核酸序列，助力基因表达分析和染色体结构研究。

分子生物传感
基于FAM的荧光特性，结合分子开关、传感器设计，实现对金属离子、小分子物质及环境条件的敏感检测。

四、合成与修饰技术
合成方法
5-氨基磷酸酯的合成主要通过固相合成技术，将含有氨基的磷酸酯基团在寡核苷酸合成过程中引入5端，再通过荧光素衍生物与氨基的反应实现标记。

偶联反应
氨基磷酸酯具有良好的反应活性，能够与多种活性基团（如活性酯、异氰酸酯）发生共价连接，确保染料与核酸的稳定结合。

纯化与鉴定
标记后的核酸通过高效液相色谱（HPLC）纯化，确保高纯度和单一修饰，同时利用质谱、紫外-可见吸收光谱等方法进行结构确认。

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