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AF350 NHS,AF350琥珀酰亚胺酯

时间:2025-08-06 14:44:48       浏览:13

AF350 NHS,即 Alexa Fluor 350 NHS Ester,是一种带有N-羟基琥珀酰亚胺酯(NHS ester)活性基团的蓝色荧光染料衍生物,广泛应用于蛋白质、肽、寡核苷酸等分子的共价荧光标记。

化学结构与反应机理
AF350 NHS由两部分构成:

Alexa Fluor 350 荧光染料核心:这是一个具有高量子产率和良好抗光漂白能力的蓝色荧光团,适合用于高分辨荧光成像。

NHS酯活性基团:NHS酯是一种常用于生物分子标记的化学反应基团,它能够与生物分子中的一级胺(—NH₂)发生反应,生成稳定的酰胺键。

反应原理如下:
AF350 NHS与蛋白质、寡核苷酸或小分子中的游离氨基(主要存在于赖氨酸残基上)发生共价反应,在中性或微碱性缓冲液(pH 7.5–8.5)中形成稳定的共价连接,从而实现荧光标记。

主要应用领域

1. 蛋白质与抗体标记
AF350 NHS广泛应用于蛋白质、抗体的荧光标记,可用于Western blot、ELISA、免疫组化(IHC)和免疫荧光(IF)等生物学实验。其激发波长远离常用荧光素如FITC和Cy3,可用于多色荧光共定位实验。

2. 流式细胞术(Flow Cytometry)
其明亮的蓝色荧光使其可用于流式细胞术中特异性标记细胞表面蛋白或细胞内目标。由于激发光靠近紫外线波段,AF350染料在需要利用UV或近UV激光器的设备中表现出色。

3. 核酸探针与杂交探针标记
AF350 NHS可以用于寡核苷酸或DNA探针的末端标记,用于原位杂交(FISH)、qPCR探针或核酸芯片等高通量分子检测平台。

4. 多重染色成像(Multiplex Imaging)
AF350发射蓝色荧光,在多重免疫染色中可与绿色(如AF488)、橙色(如Cy3)、红色(AF594)和远红色(AF647)等染料组合使用,实现高分辨率多色成像分析。

5. 时间分辨荧光成像(TR-FRET)或FRET分析

AF350也可作为FRET的供体染料,参与共振能量转移实验,从而分析分子间相互作用。

AF350 NHS

产品名称:AF350 NHS
用途:科研
状态:固体/粉末/溶液
保存:冷藏
供应:西安瑞禧生物科技有限公司
西安瑞禧生物科技有限公司经营的产品种类包括有:原料药、抑制剂、天然产物、COF、MOF单体系列:三蝶烯衍生物、金刚烷衍生物、四苯甲烷衍生物、多胺系列、多醛系列、联吡啶衍生物、卟啉衍生物、苯乙炔衍生物等;抑制剂&染料;原料药及中间体;OLED光电材料单体系列:共轭苯衍生物、咔唑、噻吩、苯并呋喃和苝/萘酐衍生物等;聚酰亚胺系列:聚酰亚胺、二胺和二酐;有机硅系列:单体、有还原剂、保护剂和偶联剂等;可光聚合液晶小分子等。
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