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CY5.5标记甘氨脱氧胆酸,cy5.5-Glycodeoxycholic acid的制备方法

时间:2025-08-07 11:20:52       浏览:10
CY5.5标记甘氨脱氧胆酸,cy5.5-Glycodeoxycholic acid的制备方法
甘氨脱氧胆酸是由脱氧胆酸与甘氨酸结合形成的胆汁酸衍生物,具有良好的两亲性和生物相容性。将CY5.5染料标记于甘氨脱氧胆酸上,使其具备近红外荧光特性,方便在生物成像及脂质相关研究中的追踪与检测。该标记物的制备通常通过羧基活化和胺基偶联反应完成,过程包括原料准备、活化、偶联、纯化及表征等步骤。
1. 原料准备
甘氨脱氧胆酸(Glycodeoxycholic acid):商业购得或通过脱氧胆酸与甘氨酸酰胺化合成获得,要求高纯度和干燥。
CY5.5-NHS酯(N-hydroxysuccinimide活化酯):作为活化的荧光染料,与甘氨脱氧胆酸的氨基形成共价酰胺键。
溶剂及缓冲液:一般使用无水的有机溶剂如二甲基亚砜(DMSO)、N,N-二甲基甲酰胺(DMF)及弱碱性缓冲液(如pH 7.5-8.5的碳酸盐缓冲液)以促进反应。
2. 羧基活化与偶联反应
甘氨脱氧胆酸上的羧基通过预先转化为活化酯或直接与CY5.5-NHS酯反应实现偶联。偶联反应步骤如下:
在干燥且无水的条件下,将甘氨脱氧胆酸溶解于适当溶剂中。
缓慢加入CY5.5-NHS酯,保持反应体系pH在7.5-8.5之间,促使氨基对活化酯位点发生亲核攻击,形成稳定的酰胺键。
反应在室温或适度温度(约25-37℃)下进行,反应时间一般为数小时至过夜,以保证充分偶联。
3. 反应监控与终止
通过高效液相色谱(HPLC)或薄层色谱(TLC)监测反应进度,确认CY5.5-NHS酯消耗及偶联产物生成。反应完成后,加入适量终止剂(如羟胺)以清除未反应的活化酯。
产品名称:CY5.5标记甘氨脱氧胆酸,cy5.5-Glycodeoxycholic acid
纯度:95%+
规格:mg/g
用途:科研

状态:固体/粉末/溶液


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