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CY5-PTD-5;花菁染料CY5标记穿膜肽PTD-5的制备方法

时间:2025-08-19 10:16:17       浏览:6
CY5-PTD-5;花菁染料CY5标记穿膜肽PTD-5的制备方法
CY5-PTD-5 是一种由花菁染料CY5与细胞穿膜肽PTD-5偶联而成的荧光探针复合物,其设计目的在于实现高效的细胞膜穿透与分子递送,同时赋予分子强烈的近红外荧光特性。PTD-5 是一类短肽(通常来源于HIV-Tat蛋白、Penetratin等穿膜肽结构衍生序列),具有高效跨膜转运能力,可携带多种小分子或大分子进入细胞质和细胞核。通过与CY5标记结合,研究人员能够实现对PTD-5进入细胞的荧光跟踪,从而在药物递送、基因导入、蛋白质传输等研究中提供直观的可视化工具。
在制备方法上,CY5-PTD-5的合成主要依赖于化学偶联反应。通常采用的策略包括:
首先,将PTD-5肽序列通过固相合成(Solid Phase Peptide Synthesis, SPPS)制备,肽链末端保留氨基或半胱氨酸侧链巯基作为功能化位点。随后选择CY5活性衍生物,例如CY5-NHS ester 或 CY5-maleimide。若PTD-5末端为游离氨基,则使用CY5-NHS酯,通过与赖氨酸残基或肽N端的氨基发生酰胺键偶联,实现稳定结合;若PTD-5含有半胱氨酸残基,则采用CY5-maleimide,通过巯基-马来酰亚胺反应实现高效、定点标记。反应通常在无水DMF或DMSO溶剂体系中进行,并在弱碱条件(pH 8.0-8.5)下完成,反应时间2-6小时即可获得较高的标记率。
标记后的CY5-PTD-5通过反相高效液相色谱(RP-HPLC)进行纯化,收集主峰产物,并利用质谱(MALDI-TOF或ESI-MS)确认分子量,确保标记效率与纯度。紫外-可见吸收光谱与荧光光谱可进一步验证CY5的光学特性是否保持完好。终获得的CY5-PTD-5在水溶液中具有良好溶解度,可直接用于细胞实验。
产品名称:CY5-PTD-5;花菁染料CY5标记穿膜肽PTD-5
纯度:95%+
规格:mg/g
用途:科研

状态:固体/粉末/溶液


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