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DAF-2DA,全称为 4,5-diaminofluorescein-2-diacetate,是另一种经典 NO 探针。与 DAF-FM 不同的是,DAF-2DA 通过二乙酸酯(diacetate)修饰,使其能够透过细胞膜,进入细胞后被胞内酯酶水解。
常用名 4,5-二氨基荧光素二乙酸酯
英文名 4,5-Diaminofluorescein diacetate
CAS号 205391-02-2
分子量 446.409
密度 1.5±0.1 g/cm3
沸点 719.0±60.0 °C at 760 mmHg
分子式 C24H18N2O7
熔点 N/A
闪点 320.0±29.2 °C
作用机理
DAF-2DA 进入细胞后,经胞内酯酶水解,去除乙酸酯基,生成亲水性的 DAF-2。随后,DAF-2 可与 NO 的氧化中间体(如 N2O3)反应,形成苯并三唑类荧光产物,从而显著增强绿色荧光信号,实现对细胞内 NO 的检测。
应用领域
细胞内 NO 成像
DAF-2DA 是研究 NO 生成和分布的常用细胞探针,可在荧光显微镜下实时观察细胞内 NO 的动态变化。
组织与活体研究
由于其细胞通透性良好,也可用于组织切片或动物模型中 NO 的检测。
信号通路研究
NO 在神经传导、免疫调控、血管扩张等生理过程中扮演重要角色,DAF-2DA 可帮助研究这些信号通路中的 NO 动态。
优势
细胞膜通透性强,可直接进入细胞。
与 NO 的反应灵敏,背景干扰低。
荧光增强明显,便于定性和定量检测。
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