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CY5标记的刀豆蛋白A CY5-Concanavalin-A
Cy5-Concanavalin A 是通过将刀豆蛋白A(Concanavalin A, Con-A, 来源于刀豆种子,约26 kDa)与花菁染料Cyanine5(Cy5)偶联形成的荧光标记物。Con-A 属于糖结合凝集素,能够特异性识别α-D-葡萄糖和α-D-甘露糖残基,在糖类识别、免疫分析及生物材料功能化研究中应用。通过Cy5偶联,分子获得可视化荧光信号,同时保持蛋白的结合特性。
反应活性特点:
羟基和氨基反应位点——Con-A含有多种赖氨酸残基的氨基,可与Cy5-NHS酯发生酰胺化反应,形成稳定共价键。该反应通过亲核取代机理进行,赖氨酸氨基攻击NHS酯碳原子,脱去NHS,实现荧光标记。
空间与活性调控——为了避免荧光偶联影响糖结合位点,反应条件需控制染料与蛋白摩尔比(通常1:5至1:10),保持蛋白构象和结合活性不受破坏。
pH与缓冲体系——偶联反应通常在弱碱性环境下(pH 7.5–8.5)进行,使用PBS或磷酸盐缓冲液,并添加三乙胺等轻碱调节pH,提高羧基活化效率及氨基亲核性。
温度与时间控制——反应温度多控制在室温至25℃,避免高温导致蛋白变性或荧光团降解。反应时间一般为2–12小时,保证羟基和氨基充分参与偶联,同时减少副反应。
偶联效率与活性保持——Cy5-Con-A的偶联效率可通过紫外-可见光谱及荧光强度监测,同时通过糖结合实验(如与甘露糖修饰微球结合)验证蛋白功能保留情况。偶联后的蛋白保持较高结合活性,适用于糖识别及荧光成像实验。
稳定性与储存——反应完成后,产物通过透析或凝胶过滤纯化,除去未反应染料,储存在缓冲液中可保持活性和荧光信号稳定,便于长期使用。
产品名称:CY5标记的刀豆蛋白A CY5-Concanavalin-A
纯度:95%+
规格:mg/g
用途:科研
Cy5-Concanavalin A 是通过将刀豆蛋白A(Concanavalin A, Con-A, 来源于刀豆种子,约26 kDa)与花菁染料Cyanine5(Cy5)偶联形成的荧光标记物。Con-A 属于糖结合凝集素,能够特异性识别α-D-葡萄糖和α-D-甘露糖残基,在糖类识别、免疫分析及生物材料功能化研究中应用。通过Cy5偶联,分子获得可视化荧光信号,同时保持蛋白的结合特性。
反应活性特点:
羟基和氨基反应位点——Con-A含有多种赖氨酸残基的氨基,可与Cy5-NHS酯发生酰胺化反应,形成稳定共价键。该反应通过亲核取代机理进行,赖氨酸氨基攻击NHS酯碳原子,脱去NHS,实现荧光标记。
空间与活性调控——为了避免荧光偶联影响糖结合位点,反应条件需控制染料与蛋白摩尔比(通常1:5至1:10),保持蛋白构象和结合活性不受破坏。
pH与缓冲体系——偶联反应通常在弱碱性环境下(pH 7.5–8.5)进行,使用PBS或磷酸盐缓冲液,并添加三乙胺等轻碱调节pH,提高羧基活化效率及氨基亲核性。
温度与时间控制——反应温度多控制在室温至25℃,避免高温导致蛋白变性或荧光团降解。反应时间一般为2–12小时,保证羟基和氨基充分参与偶联,同时减少副反应。
偶联效率与活性保持——Cy5-Con-A的偶联效率可通过紫外-可见光谱及荧光强度监测,同时通过糖结合实验(如与甘露糖修饰微球结合)验证蛋白功能保留情况。偶联后的蛋白保持较高结合活性,适用于糖识别及荧光成像实验。
稳定性与储存——反应完成后,产物通过透析或凝胶过滤纯化,除去未反应染料,储存在缓冲液中可保持活性和荧光信号稳定,便于长期使用。
产品名称:CY5标记的刀豆蛋白A CY5-Concanavalin-A
纯度:95%+
规格:mg/g
用途:科研
状态:固体/粉末/溶液
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