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CY5-DSPE,CY5标记的二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺
Cy5-DSPE 是通过将DSPE与Cyanine5偶联形成的荧光脂质分子,其合成与纯化过程关键在于保持脂质疏水尾链结构完整、荧光标记活性及水相自组装能力。
合成步骤:
原料准备——将DSPE溶解于少量有机溶剂(如DMSO、DMF)中,保持氨基活性,避免脂质尾链聚集。Cy5-NHS酯或Cy5碳酸酯溶解于同类有机溶剂备用。
偶联反应——在弱碱性缓冲体系(pH 7.5–8.5)中,加入Cy5溶液至DSPE体系,轻轻搅拌。偶联通过氨基对活化酯的亲核攻击形成酰胺键,完成Cy5分子与DSPE头基共价结合。反应温度控制在室温,时间2–12小时,以平衡偶联效率与分子稳定性。
反应终止——反应完成后,可通过稀释缓冲液或调节pH至中性终止反应,防止过度副反应。
纯化步骤:
初步去除未反应染料——利用透析或超滤膜(MWCO适配DSPE分子量)去除自由Cy5分子及小分子副产物。
高效液相色谱(HPLC)精制——采用反相HPLC分离偶联产物,利用疏水尾链与C18柱的亲和力区分未偶联DSPE及多余Cy5,实现高纯度Cy5-DSPE分离。
产物验证——质谱(MS)确认分子量及偶联情况,核磁共振(NMR)分析头基结构与酰胺键形成,紫外/荧光光谱测定荧光特性及偶联效率。
储存与稳定性——纯化后的Cy5-DSPE可在缓冲液或干粉条件下低温储存,保持脂质尾链结构、荧光活性及水相自组装能力,适用于脂质体标记及生物膜研究。
产品名称:CY5-DSPE,CY5标记的二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺
纯度:95%+
规格:mg/g
用途:科研
Cy5-DSPE 是通过将DSPE与Cyanine5偶联形成的荧光脂质分子,其合成与纯化过程关键在于保持脂质疏水尾链结构完整、荧光标记活性及水相自组装能力。
合成步骤:
原料准备——将DSPE溶解于少量有机溶剂(如DMSO、DMF)中,保持氨基活性,避免脂质尾链聚集。Cy5-NHS酯或Cy5碳酸酯溶解于同类有机溶剂备用。
偶联反应——在弱碱性缓冲体系(pH 7.5–8.5)中,加入Cy5溶液至DSPE体系,轻轻搅拌。偶联通过氨基对活化酯的亲核攻击形成酰胺键,完成Cy5分子与DSPE头基共价结合。反应温度控制在室温,时间2–12小时,以平衡偶联效率与分子稳定性。
反应终止——反应完成后,可通过稀释缓冲液或调节pH至中性终止反应,防止过度副反应。
纯化步骤:
初步去除未反应染料——利用透析或超滤膜(MWCO适配DSPE分子量)去除自由Cy5分子及小分子副产物。
高效液相色谱(HPLC)精制——采用反相HPLC分离偶联产物,利用疏水尾链与C18柱的亲和力区分未偶联DSPE及多余Cy5,实现高纯度Cy5-DSPE分离。
产物验证——质谱(MS)确认分子量及偶联情况,核磁共振(NMR)分析头基结构与酰胺键形成,紫外/荧光光谱测定荧光特性及偶联效率。
储存与稳定性——纯化后的Cy5-DSPE可在缓冲液或干粉条件下低温储存,保持脂质尾链结构、荧光活性及水相自组装能力,适用于脂质体标记及生物膜研究。
产品名称:CY5-DSPE,CY5标记的二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺
纯度:95%+
规格:mg/g
用途:科研
状态:固体/粉末/溶液
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