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Cy5-OVA,CY5标记的卵清蛋白的合成步骤
Cy5-PE 是将荧光染料 Cy5 与磷脂酰乙醇胺(PE)通过共价偶联形成的功能化脂质分子。PE 分子结构中包含疏水的脂肪酸尾部和亲水的乙醇胺头基,其中的胺基提供了与 Cy5 活性衍生物(如 Cy5-NHS 酯或 Cy5-Alkyne)形成酰胺键或点击化学连接的理想位点。通过此技术,可获得具有稳定荧光信号且在膜体系中功能保持的标记脂质。
制备方法通常首先将 PE 溶解于干燥的有机溶剂体系中,如氯仿(CHCl₃)、二氯甲烷(DCM)或甲苯,以保证脂质完全溶解。为了避免偶联反应中水分干扰,所有溶剂需脱水并在氮气气氛下操作。随后,加入适量的有机碱(如三乙胺或DIPEA)以激活 PE 的胺基,使其能高效与 Cy5 活性酯反应。Cy5-NHS 或 Cy5-炔基溶解于相同溶剂中,并通过滴加方式缓慢加入 PE 溶液,以保证均匀反应并减少局部过浓导致的副反应。反应过程通常在室温或 30–37°C 下进行,并保持氮气保护,持续搅拌 12–24 小时。温和条件确保 Cy5 分子荧光稳定性,同时防止脂质氧化或结构破坏。反应完成后,混合物通过硅胶柱层析或高效液相色谱(HPLC)分离,以去除未反应的 Cy5 和杂质。纯化后的 Cy5-PE 通常呈红色粉末或红紫色油状物,可溶于有机溶剂或脂质体制备体系中。
产物的结构可通过质谱(MS)确认偶联成功及标记数目,通过核磁共振(NMR)分析脂质骨架完整性。光学特性通过紫外-可见光谱和荧光光谱检测,可定量荧光强度及稳定性。制备中可通过调整 Cy5 与 PE 的摩尔比控制标记密度,实现荧光强度与脂质功能的平衡。
产品名称:Cy5-OVA,CY5标记的卵清蛋白
纯度:95%+
规格:mg/g
用途:科研
状态:固体/粉末/溶液
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