CY5-Hyaluronate，CY5标记的透明质酸的合成步骤

透明质酸（Hyaluronate, HA）是一种多糖，由重复的D-葡萄糖醛酸和N-乙酰-D-葡萄糖胺单元组成，具有良好的生物相容性和水凝胶特性。通过Cyanine 5（Cy5）标记形成Cy5-Hyaluronate，可用于纳米药物递送示踪、组织工程及生物分子研究。其合成步骤主要涵盖活化、偶联、纯化及表征四个方面。

合成步骤
羧基活化
HA分子含有羧基功能，可作为主要偶联位点。首先，在水相缓冲液（pH 5.5–7.5）中加入EDC（1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺）和NHS（N-羟基琥珀酰亚胺）进行活化，形成HA-NHS活性酯。反应通常在室温或低温（4–25°C）条件下进行，以避免多糖链断裂和结构降解。活化时间一般为30分钟至1小时，确保羧基充分活化。
Cy5偶联
将预先溶解在微量DMSO中的Cy5-NH₂加入到活化的HA溶液中，形成酰胺键偶联。偶联反应在弱缓冲体系下进行，温和搅拌2–6小时，反应进程可通过荧光强度检测监控。Cy5与HA羧基摩尔比通常控制在1:5至1:10，以获得适度标记而不破坏HA生物功能。
纯化步骤
偶联完成后，产物需要去除未反应的Cy5小分子及副产物：
透析：使用适当分子量截断（MWCO）的透析袋在去离子水中反复透析，去除小分子杂质。
凝胶过滤或分子筛柱层析：进一步分离和纯化高分子Cy5-HA，获得均一分子量分布。
冻干：纯化后产物可冻干储存，便于长期保存与使用。
表征与验证
荧光光谱：检测Cy5标记强度及光稳定性。
核磁共振（NMR）或红外光谱（FTIR）：验证HA链结构及偶联成功。
分子量测定（GPC）：确保HA链未降解，保持分子量分布稳定。
水溶性及黏度测试：确认标记后HA仍保持良好的溶解性和流变性质。
产品名称：CY5-Hyaluronate，CY5标记的透明质酸
纯度：95%+
规格：mg/g
用途：科研

状态：固体/粉末/溶液

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仅用于科研，不能用于人体。小编axc