Cy5-血清前白蛋白，Cy5-PA，Cy5标记血清前白蛋白

CY5标记血清前白蛋白（Prealbumin, PA）是一种将血清前白蛋白蛋白分子与近红外荧光染料Cyanine5（CY5）共价结合而得到的荧光探针。PA是一种分子量约55 kDa的小型血浆蛋白，含有多个赖氨酸残基和N端游离氨基，适合与CY5-NHS酯等活性基团发生共价反应。标记后的CY5-PA兼具蛋白的生物分子识别特性与CY5的光学可检测功能。
制备方法概述：
缓冲体系准备：将PA溶解于pH 7.5–8.5的碳酸氢钠缓冲液或磷酸缓冲液中（浓度约1–5 mg/mL），保证蛋白稳定性和反应活性。
CY5-NHS偶联：将CY5-NHS酯溶解于少量无水DMSO中，缓慢加入到蛋白溶液中（染料与蛋白摩尔比通常为3–5:1），轻轻混匀，室温避光反应1–2小时。
反应终止与去除游离染料：反应完成后，通过透析（MWCO 10–30 kDa）、凝胶过滤柱（如Sephadex G-25）或高速离心过滤器去除未偶联的自由CY5染料。
纯化与储存：收集纯化后的CY5-PA，冻干或分装储存于4°C避光条件下，必要时加入0.02%叠氮钠防腐。
表征：使用UV-Vis光谱（650 nm吸收峰）、荧光光谱（发射峰约670 nm）及SDS-PAGE分析标记程度和纯度，同时可通过BCA或Bradford法检测蛋白浓度。
主要特点与应用：
光学特性：远红外激发与发射信号强，适合细胞内或体外成像。
稳定性：酰胺键连接牢固，荧光信号在缓冲体系中保持稳定，便于长期实验使用。
分子功能保留：蛋白结构和结合能力大部分保留，可用于载体标记或蛋白相互作用研究。
应用场景：可用于免疫检测、蛋白追踪、载体表面修饰、分布示踪及生物成像实验。
综上，CY5-血清前白蛋白是一种兼具蛋白生物识别功能和远红外荧光可视化能力的分子探针，制备简便、光学性能优异，适用于多种蛋白示踪与成像研究。

状态：固体/粉末/溶液

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