CAS： 407627-69-4

AF 555 NHS ester 是 Alexa Fluor 系列中的一种红色荧光染料，隶属于水溶性荧光标记试剂。其吸收峰约在555 nm，发射峰约在565 nm，属于橙红色荧光区，具有高量子产率和良好的光稳定性。NHS酯（N-hydroxysuccinimide ester）结构使其能够与含胺基的生物分子（如蛋白质、抗体、多肽或寡核苷酸）形成稳定的酰胺键，实现荧光共价标记。

AF 555 NHS ester 常用于分子探针、细胞成像、免疫标记以及多色荧光实验，尤其在需要与绿色（AF 488）或远红色（AF 647）荧光染料组合使用的实验中具有优势。其水溶性和生物相容性良好，使其适用于多种生物体系，包括活细胞和体外分析。

化学结构与性质
AF 555 NHS ester 主要由两部分组成：

Alexa Fluor 555 荧光核心：基于荧光素或螢光素衍生物的化学结构，通过共轭体系优化，实现橙红色荧光发射。经过化学修饰，染料水溶性良好，降低了非特异性结合和分子聚集，同时提高光稳定性和量子产率。

NHS活性酯（琥珀酰亚胺酯）官能团：末端NHS酯可与蛋白质或多肽的自由氨基（–NH₂）反应，形成稳定的酰胺键，实现共价偶联。NHS酯结构在缓冲液中稳定，但遇水会缓慢水解，因此标记反应通常在有机溶剂或pH 7–9缓冲体系中进行。

应用领域

蛋白质和抗体标记：AF 555 NHS ester 可通过酰胺化反应与蛋白质或抗体的氨基结合，用于免疫荧光、Western Blot 和免疫沉淀实验，实现高灵敏度检测。

细胞成像与追踪：橙红色荧光特性适合活细胞染色、膜蛋白或胞器追踪，可用于共聚焦显微镜或荧光显微镜成像。

多色荧光实验：AF 555 可与绿色荧光（如AF 488）和远红色荧光（如AF 647）组合，进行多通道共定位和分子互动研究。

生物分子定量分析：通过荧光标记蛋白质、抗体或多肽，结合荧光板读数，可实现高灵敏度和定量分析。

FRET和分子探针设计：AF 555 可作为FRET供体或受体，与匹配的淬灭剂或荧光染料形成FRET体系，用于研究蛋白质相互作用、酶活性或分子动力学。

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