常用名 5-氯甲基荧光素二乙酸酯

英文名 Cellhunt Green CMFDA [5-Chloromethylfluorescein Diacetate]

CAS号 136832-63-8

分子量 464.85100

密度 1.49 g/cm3

沸点 657.5ºC at 760 mmHg

分子式 C25H17ClO7

闪点 238.3ºC

CellTracker Green CMFDA（5-chloromethylfluorescein diacetate）是一种绿色荧光活性染料，属于氯甲基荧光酯类探针。它可在活细胞内长期保持荧光，常用于细胞迁移、增殖以及分化实验中。激发波长约为 492 nm，发射波长约为 517 nm，与蓝色和红色荧光染料兼容，适用于多重标记和共聚焦成像。

化学特性
CMFDA 是一种非荧光的前体分子，具有二乙酸酯保护基团，使其能够轻易通过细胞膜进入活细胞内。进入细胞后，细胞内酯酶将保护基团切除，生成可与细胞内巯基结合的活性氯甲基荧光分子，从而在细胞内形成稳定共价结合。这种结构特性保证了荧光信号在细胞内长期稳定，并能随细胞分裂均匀分配。

使用方法

染料溶解：CMFDA 可溶于 DMSO，制备成 10 mM 的储备液，避光低温保存。

细胞染色：根据细胞类型和实验目的，将储备液稀释至 5–20 μM，与细胞悬液混合，37°C 孵育 15–60 分钟。

洗涤：用培养基或 PBS 清洗细胞，去除多余未结合染料。

培养与成像：染色细胞可继续培养或直接进行荧光显微镜、流式细胞仪检测。

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