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Cyanine5-PEG-Transferrin,CY5-聚乙二醇-转铁蛋白
CY5-PEG-Transferrin 是将近红外荧光染料 Cy5 通过聚乙二醇(PEG)柔性链共价偶联至转铁蛋白(Transferrin, Tf)分子的产物。转铁蛋白是一种铁离子结合蛋白,含有两条亚基和若干赖氨酸残基,具有高亲和力的铁结合位点。PEG-Cy5 偶联通过化学官能团实现荧光标记,同时保持蛋白的铁结合功能。
反应条件设计• 缓冲体系:通常在 pH 7.2–7.5 的 PBS 或 HEPES 缓冲液中进行,维持转铁蛋白构象稳定,避免过酸或过碱导致蛋白失活。
• 温度控制:反应常在 4–25°C 下进行,低温减少蛋白降解,高温会加速偶联反应但可能影响蛋白结构。
• Cy5-PEG 活性基团:常使用 NHS-酯或马来酰亚胺末端,分别与蛋白赖氨酸氨基或半胱氨酸硫基反应形成稳定共价键。
• 摩尔比优化:Cy5-PEG 与转铁蛋白摩尔比通常在 2:1–10:1,既保证荧光标记充分,又避免过度修饰影响蛋白功能。
• 反应时间:一般 2–12 小时,需通过小规模试验确定佳条件,保证偶联效率和蛋白活性。
• 终止条件:可用甘氨酸或 Tris 缓冲终止 NHS-酯反应,或者用还原剂终止马来酰亚胺反应,避免过量活性基团残留。
纯化与储存
• 通过凝胶过滤或透析去除未反应的 Cy5-PEG,获得纯化的荧光标记蛋白。
• 储存于 PBS 或含少量甘油的缓冲液中,4°C 避光,保证荧光强度和蛋白活性长期稳定。
应用意义
优化的反应条件保证 CY5-PEG-Transferrin 保留铁结合功能和荧光性能,可用于细胞摄取研究、靶向递送及荧光成像实验,为分子和纳米研究提供可视化工具。
产品名称:Cyanine5-PEG-Transferrin,CY5-聚乙二醇-转铁蛋白
纯度:95%+
规格:mg/g
用途:科研
状态:固体/粉末/溶液

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