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Cyanine5-Avidin,Cy5-亲和素
Cy5-Avidin 是将近红外荧光染料 Cy5 与亲和素(Avidin)蛋白分子通过共价偶联形成的荧光标记产物。亲和素是一种四聚体糖蛋白,能够高特异性结合生物素,用于免疫分析、分子探针及生物成像。Cy5 偶联赋予其可视化能力,使其在生物标记和分子检测中应用。
偶联前准备• 亲和素溶液制备:将亲和素溶解于缓冲液(如 PBS, pH 7.4),保证蛋白稳定性。
• Cy5 活化:选择 Cy5-NHS 酯或 Cy5-MAL(马来酰亚胺)作为活性染料,确保可与蛋白氨基或巯基反应。
共价偶联步骤
• NHS 酯偶联:Cy5-NHS 酯通过亲核加成与亲和素赖氨酸侧链氨基形成稳定酰胺键。
• 马来酰亚胺偶联:如需位点特异性标记,可利用亲和素中可用的半胱氨酸硫基与 Cy5-MAL 反应,形成共价硫醚键。
• 反应条件:温和条件下进行(4–25°C,缓冲体系 pH 7–8),反应时间 1–12 小时,避免蛋白聚集或变性。
后处理及纯化
• 去除游离染料:通过透析或凝胶过滤(Sephadex G-25)去除未偶联的 Cy5 分子。
• 浓缩与缓冲调节:通过超滤浓缩蛋白,调整至所需实验浓度,并保持适宜 pH 和离子强度。
特性与应用
• 高特异性结合:Cy5-Avidin 保留结合生物素的能力,可用于标记生物素化抗体、蛋白或核酸。
• 荧光追踪:Cy5 近红外发射便于体外及体内成像,适合免疫荧光实验和分子动态研究。
• 应用灵活:可用于免疫分析、细胞成像、荧光显微镜或多功能生物标记平台。
产品名称:Cyanine5-Avidin,Cy5-亲和素
纯度:95%+
规格:mg/g
用途:科研
状态:固体/粉末/溶液

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