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CY5荧光染料标记GLP-1胰高血糖素样肽-1的反应步骤概述

时间:2025-08-27 11:13:05       浏览:86

CY5荧光染料标记GLP-1胰高血糖素样肽-1的反应步骤概述

CY5-GLP-1 是通过将近红外荧光染料 Cyanine5(CY5)共价偶联至 GLP-1 多肽分子形成的标记衍生物。GLP-1 是一种由 30 个氨基酸残基组成的胰高血糖素样肽,具有多种生物功能,包括调节胰岛素分泌和血糖稳态。CY5-GLP-1 的制备旨在实现多肽的可视化追踪,用于药物递送、分布动力学研究及体内成像实验。

反应步骤概述
• 多肽溶液制备:将 GLP-1 溶解于 pH 7.2–7.4 的缓冲液(如 PBS),保证多肽稳定性和活性。
• CY5 活性基团选择:通常使用 CY5-NHS 酯或 CY5-MAL(马来酰亚胺),分别与 GLP-1 的赖氨酸 ε-氨基或半胱氨酸硫醇反应。
• 偶联反应:在缓冲液中加入适量 CY5 试剂,轻轻混合,反应时间 2–4 小时,以室温或低温条件保持多肽活性。
• 控制标记密度:通过调节 CY5 与 GLP-1 的摩尔比,可实现单标记或多标记,兼顾荧光强度与多肽功能。
• 纯化步骤:反应结束后,使用透析、凝胶过滤或高效液相色谱(HPLC)去除未反应的染料,获得高纯度的 CY5-GLP-1。
• 表征:通过质谱或 UV-Vis 光谱验证偶联效率,确认荧光标记成功且多肽结构未被破坏。
注意事项
• 保持缓冲体系 pH 适中,避免高温或端 pH 破坏多肽结构。
• 偶联过程应避免强烈光照,防止 CY5 荧光猝灭。
• 偶联后产品应低温避光储存,保持荧光强度和生物活性。
产品名称:CY5荧光染料标记GLP-1胰高血糖素样肽-1
纯度:95%+
规格:mg/g
用途:科研

状态:固体/粉末/溶液


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