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CY7.5-Transferrins,CY7.5转铁蛋白的合成过程

时间:2025-09-01 11:06:10       浏览:80

CY7.5-Transferrins,CY7.5转铁蛋白的合成过程

CY7.5-Transferrins 是将近红外荧光染料 Cyanine7.5 与转铁蛋白(Transferrin, Tf)偶联形成的功能性荧光蛋白。转铁蛋白是一种约80 kDa的血浆糖蛋白,具有两个铁离子结合位点及丰富的赖氨酸和半胱氨酸残基。通过CY7.5标记,转铁蛋白获得近红外荧光信号(激发约780 nm,发射约810 nm),可用于分子示踪、药物载体修饰及蛋白化学研究。

合成过程主要包括以下步骤:
蛋白溶液制备:转铁蛋白溶解于缓冲液(通常PBS,pH 7–8),确保蛋白质构象完整并维持铁离子结合状态。溶液浓度根据偶联反应需要进行调节。
染料活化与偶联:使用CY7.5-NHS或CY7.5-MAL衍生物进行化学偶联。NHS酯可与赖氨酸氨基反应形成酰胺键,而马来酰亚胺可与巯基形成硫醚键。偶联反应温和进行(4–25°C),持续时间根据蛋白浓度和染料摩尔比优化。
反应优化:调节CY7.5与Tf的摩尔比和反应条件,获得均一标记分子,同时避免过度修饰影响铁结合功能或蛋白折叠。
纯化步骤:反应结束后,通过透析、凝胶过滤色谱(如Sephadex G-25或G-50)或高速离心滤器去除未反应的染料和小分子副产物。高效液相色谱(HPLC)可进一步提高产物纯度,并确保染料偶联均匀。
结构与功能表征:采用紫外-可见/荧光光谱确认荧光特性,质谱(MS)确认偶联成功,SDS-PAGE分析分子量变化,并通过铁结合实验或蛋白质活性测定确认功能保持。
CY7.5-Transferrins 结合了转铁蛋白的靶向受体识别能力与CY7.5的近红外荧光,可用于体内外成像、药物递送和生物分子追踪。其合成与纯化策略保证了荧光均匀性、蛋白功能完整性和高纯度产物,为纳米药物载体修饰、靶向分子研究及分子示踪实验提供了可靠工具。
产品名称:CY7.5-Transferrins,CY7.5转铁蛋白
纯度:95%+
规格:mg/g
用途:科研

状态:固体/粉末/溶液


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仅用于科研,不能用于人体。小编axc
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