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CY7-Momordin,CY7标记木瓜蛋白酶的化学反应原理特点
CY7-Momordin是将近红外荧光染料Cyanine7与木瓜蛋白酶(Momordin)偶联形成的标记蛋白。Momordin是一种糖蛋白,含有多肽链和糖基结构,具有丰富的赖氨酸和半胱氨酸残基,为化学反应提供多种可修饰位点。CY7标记赋予其荧光特性,同时可用于分析Momordin的化学反应特性。
化学反应原理特点:偶联位点选择
CY7染料可通过NHS酯与Momordin分子中的赖氨酸ε-氨基形成稳定酰胺键。
对于存在自由巯基的半胱氨酸残基,可采用maleimide基团进行Michael加成反应,形成稳定硫醚键。
选择性偶联保证Momordin的结构和糖基修饰不被破坏,维持蛋白整体稳定性。
反应机理
NHS酯偶联:活化羧基形成亲电位点,被蛋白氨基亲核进攻,生成酰胺键。该反应在pH 7–8的缓冲液中进行,可避免蛋白聚集和活性丧失。
Maleimide-巯基偶联:Michael加成使CY7与蛋白半胱氨酸特异性结合,偶联效率高,位置可控,适合功能分析。
偶联后,CY7通过柔性链连接蛋白,空间位阻小,不影响蛋白折叠或糖基功能。
反应条件优化
缓冲液类型:PBS或弱碱性缓冲液,以维持蛋白稳定性。
温度与时间:室温至略低温度,反应数小时至过夜,避免荧光淬灭。
摩尔比控制:优化CY7与Momordin的比例,保证标记效率并保留蛋白活性。
化学性质与稳定性
CY7-Momordin呈水溶性良好,荧光信号稳定。
通过透析或凝胶过滤去除游离染料,可获得高纯度标记蛋白。
柔性连接链可减轻染料对蛋白折叠和活性位点的干扰。
产品名称:CY7-Momordin,CY7标记木瓜蛋白酶
纯度:95%+
规格:mg/g
用途:科研
状态:固体/粉末/溶液

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