CY7-Silk fibroin，CY7丝素蛋白的合成步骤

CY7-铁氧还蛋白（CY7-Ferredoxin, CY7-Fdx）是一种由近红外荧光染料Cyanine7（CY7）标记的铁氧还蛋白衍生物。铁氧还蛋白是一类小型含铁-硫簇的电子转移蛋白，在光合作用、氮代谢及电子传递链中发挥重要作用。CY7-Fdx通过共价连接CY7染料，实现了蛋白的可视化追踪及功能研究。

合成步骤：
蛋白提取与纯化
从微生物或植物来源提取铁氧还蛋白，通过超滤、离子交换色谱或凝胶过滤获得高纯度蛋白。确保蛋白活性和铁硫簇完整性，为后续化学标记提供基础。提取后的Fdx溶解于适当缓冲液（pH 7–8），并调节离子强度和还原状态，以保护活性中心。
CY7染料活化
选择带活性基团的CY7染料，如NHS酯或Maleimide，溶解于干燥的有机溶剂（如DMSO或DMF）中。NHS酯用于与蛋白氨基偶联，Maleimide则用于巯基偶联。为减少对铁硫簇的干扰，可在反应体系中添加低浓度还原剂（如DTT或TCEP）保护巯基活性。
共价偶联反应
将活化的CY7缓慢加入Fdx溶液中，在缓冲液条件下反应数小时。反应温度一般控制在室温至30°C，避免过高温度导致蛋白变性或铁硫簇破坏。偶联比例和反应时间可调控荧光密度和蛋白活性保持率。
纯化与分离
反应完成后，通过透析、凝胶过滤或高效液相色谱（HPLC）去除未反应的染料及小分子杂质。所得CY7-Fdx为水溶性复合物，保留铁硫簇结构，可直接用于光学成像、电子传递研究或分子探针实验。
结构与功能验证
通过UV-Vis光谱和荧光光谱确认CY7标记成功及近红外荧光性能。通过SDS-PAGE、质谱或铁含量测定验证蛋白完整性及铁硫簇保留情况。CY7-Fdx在水溶液中应表现出良好稳定性，荧光信号强且不影响电子转移功能。
产品名称：CY7-Silk fibroin，CY7丝素蛋白
纯度：95%+
规格：mg/g
用途：科研

状态：固体/粉末/溶液

推荐产品：

壳聚糖荧光标记CY7-Chitosan
花菁染料CY7标记壳聚糖CY7-壳聚糖
CY7-Chitosan
CY7标记壳聚糖
CY7-壳聚糖
CY7偶联壳聚糖
CY5.5标记壳聚糖
CY5.5-壳聚糖

仅用于科研，不能用于人体。小编axc