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FITC-Streptavidin,荧光素标记链霉亲和素
FITC-Streptavidin是通过异硫氰酸荧光素(Fluorescein Isothiocyanate, FITC)与链霉亲和素(Streptavidin, SA)分子共价偶联形成的荧光衍生物。链霉亲和素是一种来源于链霉菌的四聚体糖蛋白,每个亚基含约159个氨基酸残基,呈高度稳定的β折叠结构,并具有强的生物素结合能力(Kd ≈ 10⁻¹⁴–10⁻¹⁵ M),使其成为分子生物学中使用的标记和捕获工具。
在化学结构上,FITC-Streptavidin结合了荧光素和蛋白的特性,主要表现如下:偶联位点与化学键类型
Streptavidin分子中含有多个赖氨酸残基的ε-氨基,为FITC偶联提供反应位点。
FITC的异硫氰酸基(–N=C=S)通过亲核加成与赖氨酸氨基反应,形成稳定的硫脲键(–NH–C(=S)–NH–),保证荧光素与蛋白牢固结合。
偶联设计通常避免干扰生物素结合口袋,从而保留链霉亲和素的高亲和力功能。
蛋白质结构特点
Streptavidin为四聚体,每个亚基相互作用稳定,形成球形或椭球形整体结构。
FITC标记通常在亚基表面随机分布,不会破坏蛋白的三级或四级结构。
四聚体结构使每个分子可同时结合四个生物素分子,赋予标记蛋白多价结合能力。
荧光性质
FITC赋予Streptavidin绿色荧光,激发峰约495 nm,发射峰约520 nm。
荧光标记可用于分子示踪、免疫检测、流式细胞术和荧光成像等实验。
分子稳定性与修饰灵活性
Sulfhydryl或赖氨酸残基的选择性偶联策略,可调节标记密度和荧光强度。
Streptavidin的稳定四聚体和β折叠结构保证在多种缓冲体系中保持功能和结构完整。
标记后的FITC-Streptavidin在水溶液中稳定,可用于长期实验和储存。
应用优势
高亲和力结合生物素,结合FITC荧光可实现双功能:示踪和捕获。
可用于免疫荧光、Western blot、ELISA、流式细胞分析及纳米生物技术领域。
荧光标记的多价结合能力可提高信号放大效果,适用于低丰度分子检测。
综上,FITC-Streptavidin通过稳定的硫脲键将荧光素牢固结合于链霉亲和素表面,
产品名称:FITC-Streptavidin,荧光素标记链霉亲和素
纯度:95%+
规格:mg/g
用途:科研
状态:固体/粉末/溶液

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