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ICG-ConA,吲哚菁绿标记刀豆球蛋白A

时间:2025-09-10 11:17:34       浏览:90

ICG-ConA,吲哚菁绿标记刀豆球蛋白A

ICG-ConA是一种通过化学偶联将吲哚菁绿(Indocyanine Green, ICG)标记到刀豆球蛋白A(Concanavalin A, ConA)上的荧光标记化合物。ConA是一种具有高特异性糖结合能力的植物凝集素,可识别多种糖类分子,应用于糖蛋白研究、细胞表面标记及分子识别实验。ICG的近红外(NIR)荧光特性(吸收峰约780 nm,发射峰约810–830 nm)使ICG-ConA能够实现分子级荧光成像和糖类识别的结合。

ICG-ConA的合成步骤主要分为ICG活化、蛋白质偶联和产物纯化三个阶段。首先,ICG分子末端的羧基通过NHS(N-羟基琥珀酰亚胺)活化生成ICG-NHS中间体,提高其亲电性。其次,将ICG-NHS缓慢加入ConA溶液中(pH 7–8,PBS缓冲液或碳酸盐缓冲液),利用ConA表面赖氨酸氨基残基进行亲核进攻,形成稳定的酰胺键。该步骤在温和条件下进行(室温至轻微加热),避免破坏ConA的糖结合活性。偶联过程中,ICG与ConA的摩尔比可根据所需荧光强度和蛋白质功能保留进行调控,以实现高效偶联而不影响蛋白质的生物活性。
偶联完成后,ICG-ConA通常通过透析、超滤或凝胶过滤柱(Sephadex G-25/G-50)去除未反应的ICG和副产物,从而获得高纯度荧光蛋白。纯化后的ICG-ConA溶液呈绿色透明状态,可溶于PBS或生理缓冲液中,保持蛋白质的空间构象和糖结合能力。
在表征阶段,可通过紫外-可见光谱确认ICG特有的吸收峰,荧光光谱显示激发峰和发射峰未受明显影响。蛋白质浓度和偶联率可通过BCA蛋白定量或UV吸光度法测定。SDS-PAGE可用于检测蛋白质结构完整性,质谱分析可进一步验证ICG共价偶联的成功。功能性实验(如糖结合试验)可确认ConA糖结合活性保持,从而确保ICG-ConA在分子识别及荧光成像中的应用可靠性。
产品名称:ICG-ConA,吲哚菁绿标记刀豆球蛋白A
纯度:95%+
规格:mg/g
用途:科研

状态:固体/粉末/溶液


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