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RB-L-Glutamine,罗丹明标记谷氨酰胺
RB-Lactoferrin 是通过化学偶联将乳铁蛋白(Lactoferrin, LF)与罗丹明 B(Rhodamine B, RB)形成的荧光标记蛋白。乳铁蛋白是一种多功能铁结合糖蛋白,存在于乳汁及体液中,具有良好的生物相容性和分子靶向性。通过 RB 偶联,乳铁蛋白获得可视化荧光信号,使其在体内外实验中可用于追踪、定位及药物递送研究,同时保持蛋白的结构和功能特性。
化学反应原理如下:偶联位点选择:乳铁蛋白分子中含有赖氨酸残基氨基和半胱氨酸残基巯基,可作为亲核反应位点与 RB 的活性官能团发生化学偶联。RB 通常以 NHS 酯、异氰酸酯或活性羧基形式存在。
酰胺键形成:RB-NHS 酯通过赖氨酸氨基的亲核攻击,形成稳定的酰胺键,实现荧光团与蛋白共价结合。此过程需在 pH 7.2–8.5 的缓冲体系中进行,以维持蛋白构象稳定,同时促进氨基的活性。
巯基偶联反应:对于 RB 含巯基反应官能团,可与乳铁蛋白的自由半胱氨酸残基发生硫醇-活性基团反应,形成稳定硫醚键,增强偶联稳定性。
反应条件优化:反应通常在室温或低温下进行 2–12 小时,以避免蛋白变性和荧光淬灭。缓冲体系选择 PBS 或 HEPES,可维持蛋白稳定并优化偶联效率。
偶联度调控:通过调整 RB 与乳铁蛋白的摩尔比,可控制荧光强度和标记密度,同时避免过度偶联影响蛋白生物活性。
纯化与验证:偶联完成后,通过透析、凝胶过滤或色谱去除未反应的 RB,并结合紫外-可见光谱、荧光光谱和 SDS-PAGE 检测偶联成功及蛋白完整性。
RB-Lactoferrin 在生物成像、药物递送、蛋白-细胞相互作用研究和靶向分子追踪等领域具有应用,其偶联方法保持了乳铁蛋白的结构功能,同时提供了稳定的荧光信号,是研究蛋白示踪和纳米载体表面修饰的重要工具。
产品名称:RB-L-Glutamine,罗丹明标记谷氨酰胺
纯度:95%+
规格:mg/g
用途:科研
状态:固体/粉末/溶液

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