CY3-Lactoferrin，花菁染料CY3标记乳铁蛋白
Cy3-Lactoferrin是通过将红橙色花菁染料Cy3共价标记至乳铁蛋白（Lactoferrin, Lf）形成的荧光标记蛋白。乳铁蛋白是一种高亲铁结合能力的单链糖蛋白，分子量约80 kDa，存在于乳汁、血清及黏膜分泌物中，具有优异的、免疫调节及金属离子结合特性。标记Cy3后，乳铁蛋白不仅保留其生物活性，同时获得稳定的荧光信号（吸收峰≈550 nm，发射峰≈570 nm），便于分子示踪和生物分析。
反应条件
偶联策略
Cy3标记乳铁蛋白通常采用NHS酯（N-hydroxysuccinimide ester）或异硫氰酸酯（isothiocyanate）衍生的Cy3作为活化前体。NHS酯可与乳铁蛋白赖氨酸的氨基残基特异性反应形成稳定的酰胺键；异硫氰酸酯可与氨基形成硫脲键。反应温和、条件可控，有利于保持乳铁蛋白的结构和功能。
缓冲体系
反应通常在pH 7.2–8.5的缓冲液中进行，如磷酸盐缓冲液（PBS）、碳酸氢盐缓冲液或HEPES缓冲液。碱性条件可提高NHS酯或异硫氰酸酯对氨基的反应速率，但需避免过高pH以防蛋白变性。
温度与时间
反应温度一般控制在4–25℃，低温可减缓蛋白降解和荧光团光降解。偶联时间通常为1–4小时，根据标记效率和蛋白浓度进行优化。高浓度蛋白和适当的染料摩尔比可提高标记效率，同时避免过度标记引起蛋白构象变化。
摩尔比与标记密度
Cy3与乳铁蛋白的摩尔比一般控制在5:1至20:1。低摩尔比可确保蛋白功能保留，高摩尔比可提高荧光强度但可能影响蛋白活性。标记密度的优化需结合荧光测定与生物活性评估。
反应终止与纯化
反应完成后，可通过凝胶过滤（如Sephadex G-25）、透析或HPLC去除未反应的Cy3染料，获得高纯度Cy3-Lactoferrin。此步骤可确保荧光信号的可靠性，并避免游离染料干扰后续实验。
储存与稳定性
纯化后的Cy3-Lactoferrin在缓冲液中可稳定数周至数月，建议避光低温储存（4℃短期，–20℃长期）。必要时添加少量甘油或蛋白稳定剂可提高长期稳定性。
总结
Cy3-Lactoferrin通过在温和条件下NHS酯或异硫氰酸酯与乳铁蛋白氨基偶联形成稳定荧光标记，可在生物示踪、免疫分析及蛋白功能研究中应用。合理控制pH、温度、摩尔比和反应时间是保证标记效率与生物活性的关键。
产品名称：CY3-Lactoferrin，花菁染料CY3标记乳铁蛋白
纯度：95%+
规格：mg/g
用途：科研

状态：固体/粉末/溶液

推荐产品：

花菁染料CY7标记巯基
CY7-Silk fibroin
CY7丝素蛋白
CY7-Streptavidin
CY7标记链霉亲和素
CY7-sucrose
CY7标记蔗糖

仅用于科研，不能用于人体。小编axc