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CY3-Filamin,花菁染料CY3标记丝状蛋白
Cy3-Filamin是通过将红橙色花菁染料Cy3共价标记至丝状蛋白(Filamin)形成的荧光蛋白衍生物。Filamin是一类高分子量的细胞骨架蛋白,存在于真核细胞中,参与细胞形态维持、信号转导和细胞迁移等生理过程。标记Cy3后,Filamin可获得强荧光信号(吸收峰≈550 nm,发射峰≈570 nm),便于在体内或体外实验中进行实时成像和功能追踪。
反应活性特点
标记策略
Cy3-Filamin通常采用NHS酯或异硫氰酸酯修饰的Cy3染料进行偶联。NHS酯可与Filamin赖氨酸残基上的氨基发生亲核反应,形成稳定酰胺键;异硫氰酸酯可与氨基形成硫脲键。该策略可实现选择性标记,保证蛋白结构和功能的完整性,同时提供高效荧光信号。
反应条件
标记反应通常在pH 7.2–8.5的缓冲液(如PBS、HEPES或碳酸氢盐缓冲液)中进行,温度控制在4–25℃。温和条件有助于维持Filamin的构象和生物活性。反应时间一般为1–4小时,可根据蛋白浓度和染料摩尔比优化标记效率。
摩尔比与标记密度控制
Cy3与Filamin的摩尔比一般设定在5:1至15:1,以获得足够荧光强度而不影响蛋白功能。过高的标记密度可能导致蛋白构象改变或功能受损,因此在设计标记方案时需兼顾荧光信号与蛋白活性。
纯化与稳定性
反应完成后,通过凝胶过滤或透析去除未反应的染料,获得高纯度Cy3-Filamin。纯化后的标记蛋白在缓冲液中稳定,可在4℃短期储存或–20℃长期保存。其荧光信号强度高、光稳定性好,适用于显微成像、流式细胞术及蛋白–蛋白相互作用研究。
应用优势
Cy3-Filamin可用于观察细胞骨架动态、Filamin介导的信号通路及细胞迁移过程。标记后的荧光可实现高分辨率成像和实时追踪,为细胞生物学研究提供直观数据。双重优势在于既可作为功能蛋白研究工具,又可作为荧光探针进行分子示踪。
总结
Cy3-Filamin结合了Cy3的高荧光性能与Filamin的生物功能,通过温和偶联策略实现高效标记。其反应活性可被调控,兼具高稳定性和生物兼容性,应用于细胞骨架研究、信号转导分析及动态成像实验中。
产品名称:CY3-Filamin,花菁染料CY3标记丝状蛋白
纯度:95%+
规格:mg/g
用途:科研
Cy3-Filamin是通过将红橙色花菁染料Cy3共价标记至丝状蛋白(Filamin)形成的荧光蛋白衍生物。Filamin是一类高分子量的细胞骨架蛋白,存在于真核细胞中,参与细胞形态维持、信号转导和细胞迁移等生理过程。标记Cy3后,Filamin可获得强荧光信号(吸收峰≈550 nm,发射峰≈570 nm),便于在体内或体外实验中进行实时成像和功能追踪。
反应活性特点
标记策略
Cy3-Filamin通常采用NHS酯或异硫氰酸酯修饰的Cy3染料进行偶联。NHS酯可与Filamin赖氨酸残基上的氨基发生亲核反应,形成稳定酰胺键;异硫氰酸酯可与氨基形成硫脲键。该策略可实现选择性标记,保证蛋白结构和功能的完整性,同时提供高效荧光信号。
反应条件
标记反应通常在pH 7.2–8.5的缓冲液(如PBS、HEPES或碳酸氢盐缓冲液)中进行,温度控制在4–25℃。温和条件有助于维持Filamin的构象和生物活性。反应时间一般为1–4小时,可根据蛋白浓度和染料摩尔比优化标记效率。
摩尔比与标记密度控制
Cy3与Filamin的摩尔比一般设定在5:1至15:1,以获得足够荧光强度而不影响蛋白功能。过高的标记密度可能导致蛋白构象改变或功能受损,因此在设计标记方案时需兼顾荧光信号与蛋白活性。
纯化与稳定性
反应完成后,通过凝胶过滤或透析去除未反应的染料,获得高纯度Cy3-Filamin。纯化后的标记蛋白在缓冲液中稳定,可在4℃短期储存或–20℃长期保存。其荧光信号强度高、光稳定性好,适用于显微成像、流式细胞术及蛋白–蛋白相互作用研究。
应用优势
Cy3-Filamin可用于观察细胞骨架动态、Filamin介导的信号通路及细胞迁移过程。标记后的荧光可实现高分辨率成像和实时追踪,为细胞生物学研究提供直观数据。双重优势在于既可作为功能蛋白研究工具,又可作为荧光探针进行分子示踪。
总结
Cy3-Filamin结合了Cy3的高荧光性能与Filamin的生物功能,通过温和偶联策略实现高效标记。其反应活性可被调控,兼具高稳定性和生物兼容性,应用于细胞骨架研究、信号转导分析及动态成像实验中。
产品名称:CY3-Filamin,花菁染料CY3标记丝状蛋白
纯度:95%+
规格:mg/g
用途:科研
状态:固体/粉末/溶液

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