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CY5.5-Bovine-albumin,花菁染料CY5.5标记牛血清白蛋白的反应机理
CY5.5-Bovine Albumin 是通过将近红外荧光染料 CY5.5 与牛血清白蛋白(Bovine Serum Albumin, BSA)偶联形成的标记蛋白。BSA 是一种单链、多功能蛋白,具有丰富的赖氨酸残基和巯基,可作为荧光标记的化学活性位点。CY5.5 的活性衍生物(如 NHS 酯、肼基或马来酰亚胺)可与 BSA 上的氨基或巯基发生特异性共价反应,生成稳定的共价结合物,从而实现蛋白质可视化。
反应机理
NHS 酯偶联机理
CY5.5-NHS 酯是常用的活性形式,可与 BSA 中的赖氨酸 ε-氨基反应。
反应过程为亲核取代反应:赖氨酸氨基攻击 CY5.5-NHS 酯上的碳酰中心,释放 NHS 分子并形成稳定酰胺键。
该反应温和且选择性高,不破坏蛋白质的二级结构或功能。
马来酰亚胺(MAL)偶联机理
CY5.5-MAL 可与 BSA 中的游离巯基(主要在半胱氨酸残基)发生 Michael 加成反应。
巯基攻击马来酰亚胺的双键,形成稳定的硫醚键。
此类偶联适合在蛋白质巯基数量有限的情况下进行精确标记,减少非特异性修饰。
肼基偶联机理
CY5.5-hydrazide 可与 BSA 中的醛基或通过糖基氧化生成的醛基反应,形成稳定的肼键(Schiff 碱衍生物)。
适用于糖基化蛋白或经过特定处理的蛋白质表面标记。
反应条件
反应通常在中性或弱碱性缓冲液(pH 7–8.5)中进行,以保证氨基或巯基活性。
温和搅拌室温反应 1–4 小时,避免高温或端 pH 导致蛋白质变性。
偶联比例可控,调节 CY5.5 与 BSA 的摩尔比,实现标记密度可控。
表征方法
荧光光谱验证 CY5.5 标记成功,观察激发和发射峰位置。
SDS-PAGE 电泳结合荧光扫描可确认蛋白质标记和完整性。
质谱可进一步确认标记数量和分子量变化。
综上,CY5.5-Bovine Albumin 的偶联反应机理主要基于 CY5.5 活性基团与蛋白质氨基或巯基的共价结合,形成稳定的标记蛋白,实现荧光可视化,同时保持蛋白质结构和功能完整性,为生物成像和药物研究提供可靠工具。
产品名称:CY5.5-Bovine-albumin
纯度:95%+
规格:mg/g
用途:科研
CY5.5-Bovine Albumin 是通过将近红外荧光染料 CY5.5 与牛血清白蛋白(Bovine Serum Albumin, BSA)偶联形成的标记蛋白。BSA 是一种单链、多功能蛋白,具有丰富的赖氨酸残基和巯基,可作为荧光标记的化学活性位点。CY5.5 的活性衍生物(如 NHS 酯、肼基或马来酰亚胺)可与 BSA 上的氨基或巯基发生特异性共价反应,生成稳定的共价结合物,从而实现蛋白质可视化。
反应机理
NHS 酯偶联机理
CY5.5-NHS 酯是常用的活性形式,可与 BSA 中的赖氨酸 ε-氨基反应。
反应过程为亲核取代反应:赖氨酸氨基攻击 CY5.5-NHS 酯上的碳酰中心,释放 NHS 分子并形成稳定酰胺键。
该反应温和且选择性高,不破坏蛋白质的二级结构或功能。
马来酰亚胺(MAL)偶联机理
CY5.5-MAL 可与 BSA 中的游离巯基(主要在半胱氨酸残基)发生 Michael 加成反应。
巯基攻击马来酰亚胺的双键,形成稳定的硫醚键。
此类偶联适合在蛋白质巯基数量有限的情况下进行精确标记,减少非特异性修饰。
肼基偶联机理
CY5.5-hydrazide 可与 BSA 中的醛基或通过糖基氧化生成的醛基反应,形成稳定的肼键(Schiff 碱衍生物)。
适用于糖基化蛋白或经过特定处理的蛋白质表面标记。
反应条件
反应通常在中性或弱碱性缓冲液(pH 7–8.5)中进行,以保证氨基或巯基活性。
温和搅拌室温反应 1–4 小时,避免高温或端 pH 导致蛋白质变性。
偶联比例可控,调节 CY5.5 与 BSA 的摩尔比,实现标记密度可控。
表征方法
荧光光谱验证 CY5.5 标记成功,观察激发和发射峰位置。
SDS-PAGE 电泳结合荧光扫描可确认蛋白质标记和完整性。
质谱可进一步确认标记数量和分子量变化。
综上,CY5.5-Bovine Albumin 的偶联反应机理主要基于 CY5.5 活性基团与蛋白质氨基或巯基的共价结合,形成稳定的标记蛋白,实现荧光可视化,同时保持蛋白质结构和功能完整性,为生物成像和药物研究提供可靠工具。
产品名称:CY5.5-Bovine-albumin
纯度:95%+
规格:mg/g
用途:科研
状态:固体/粉末/溶液

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