CY5.5-L-Tryptophan 是一种将近红外荧光染料 CY5.5 共价偶联至色氨酸（L-Tryptophan, Trp）分子而形成的功能化氨基酸探针。色氨酸作为必需氨基酸之一，分子中含有芳香族吲哚环、氨基和羧基，提供了丰富的化学活性位点。CY5.5 是典型的花菁染料，具有激发波长约 675 nm、发射波长约 694 nm 的近红外荧光特性。CY5.5-L-Tryptophan 将色氨酸的生物化学功能与 CY5.5 的荧光特性结合，可用于蛋白质标记、氨基酸追踪及生物体系成像研究。

分子结构与功能特点

CY5.5-L-Tryptophan 的核心是通过 CY5.5 的活性官能团（如 NHS 酯或活性异氰酸酯）与色氨酸的氨基或羧基发生共价键连接。连接形成的酰胺键或酯键稳定，保证在水相环境及生物体系中不易水解。标记后的 Trp 分子保留了吲哚环结构，能够参与蛋白质构象及分子识别，同时引入 CY5.5 的近红外荧光，使其可以在细胞或体外体系中直接追踪和成像。

反应原理

1. 活性酯偶联机制

   • CY5.5 通常以 NHS 酯形式存在，其活性酯碳原子带部分正电荷，易受到亲核攻击。

   • L-Tryptophan 的 α-氨基作为亲核试剂攻击 CY5.5 的活性酯碳原子，发生酰胺化反应，生成稳定的酰胺键。

   • 反应过程中释放出 N-羟基琥珀酰亚胺（NHS）作为离去基团。

2. 反应条件优化

   • 反应通常在中性或弱碱性缓冲液（pH 7–8）中进行，保证氨基呈非质子化状态，从而提高亲核活性。

   • 室温或轻微加温（25–37℃）可加快反应速率，同时避免染料或氨基酸结构降解。

   • 反应摩尔比可调节以控制标记程度，防止过度修饰影响色氨酸的天然功能。

3. 选择性原理

   • α-氨基的亲核性优于吲哚环上的氮，因此大多数偶联发生在氨基端，保持吲哚环完整。

   • 在某些条件下，羧基也可通过酯化或缩合反应参与偶联，但通常以氨基为主要反应位点以保证分子稳定性。

4. 纯化与验证

   • 反应完成后，可通过透析或高效液相色谱（HPLC）去除未反应的 CY5.5 和副产物。

   • 质谱用于确认偶联产物的分子量变化，荧光光谱用于验证 CY5.5 激发/发射特性是否保持。

   • 成品在水相中保持良好溶解性，适用于生物成像实验。

状态：固体/粉末/溶液

推荐产品：

FITC-CTP
荧光素标记穿膜肽CTP
FITC-Curcumin
荧光素姜黄素
FITC-Cysteine
荧光素标记半胱氨酸
FITC-Cytarabine