Cy5.5-tetrazine，花菁染料CY5.5标记四嗪的制备方法概述
Cy5.5-Tetrazine 是一种功能化的近红外荧光探针，由花菁染料 CY5.5 与四嗪（Tetrazine）官能团共价连接形成的化合物。CY5.5 是典型的近红外花菁染料，激发波长约 675 nm，发射波长约 694 nm，具有高荧光量子产率、光稳定性强及在生物体系中低自发荧光干扰等优点。四嗪是一类具有高反应性的含氮杂环化合物，可参与生物正交反应（bioorthogonal reaction），尤其是与环烯/环炔体系的快速 [4+2] 逆电子需求 Diels-Alder 反应。通过将 CY5.5 与四嗪功能化结合，形成 Cy5.5-Tetrazine，使其可用于高选择性、低背景的生物分子标记与动态成像。
制备方法概述
前体选择与活化
选用带有活性基团的 CY5.5 前体，例如 CY5.5-NHS 或 CY5.5-COOH，通过化学修饰引入与四嗪偶联所需的反应位点。
四嗪衍生物通常含有氨基或羟基，用于与 CY5.5 的活性官能团形成稳定的共价键。
偶联反应
将 CY5.5 前体与四嗪在缓冲液或有机溶剂中反应。常用条件为弱碱性环境（pH 7.5–8.5），温度控制在室温至 40℃，确保荧光染料稳定。
反应过程中，四嗪的氮杂环结构与 CY5.5 的活性位点形成酰胺或酯键，实现共价连接，同时保持荧光性能和四嗪的反应活性。
纯化与表征
反应产物可通过高效液相色谱（HPLC）分离纯化，去除未反应的 CY5.5 前体和多余的四嗪衍生物。
分子结构通过质谱（MS）、核磁共振（NMR）及紫外-可见光谱（UV-Vis）确认，同时检测荧光光谱性能以保证 CY5.5 特性未受影响。
储存与使用
Cy5.5-Tetrazine 在干燥、避光条件下可长期储存。
在标记生物大分子或细胞实验中，可直接与含有环烯或环炔基团的底物反应，实现快速、特异性荧光标记。
应用优势
高选择性标记：借助四嗪的生物正交反应，实现特定分子快速结合。
低背景荧光：CY5.5 的近红外特性减少生物体系自发荧光干扰。
荧光稳定性强：适合长时间成像及动态追踪实验。
可用于体内/体外生物成像、药物递送追踪和蛋白质或多糖功能化标记。
产品名称：Cy5.5-tetrazine，花菁染料CY5.5标记四嗪
纯度：95%+
规格：mg/g
用途：科研

状态：固体/粉末/溶液

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仅用于科研，不能用于人体。小编axc