CY5.5-Insulin，花菁染料CY5.5标记胰岛素的反应步骤概述
CY5.5-Insulin 是通过将花菁染料 CY5.5 共价偶联至胰岛素（Insulin）分子形成的荧光标记蛋白。胰岛素是一种多肽激素，由 A 链（21 个氨基酸）和 B 链（30 个氨基酸）通过二硫键连接而成，调节血糖水平。CY5.5 偶联后赋予分子近红外荧光特性，用于药代动力学、组织分布和药物递送研究。
反应步骤概述
胰岛素活化
胰岛素溶解于适宜缓冲液（如 PBS, pH 7.2–7.4），确保肽链二硫键结构稳定。
可在胰岛素的赖氨酸残基或 N 端氨基进行偶联反应，选择性保护其他活性位点。
CY5.5 预处理
CY5.5 通常以 NHS 酯活化形式存在（CY5.5-NHS），可与胰岛素的自由氨基发生亲核取代反应。
溶解于无水有机溶剂或缓冲液中，控制 pH 以优化偶联效率。
共价偶联反应
将 CY5.5-NHS 缓慢加入胰岛素溶液中，轻柔搅拌，室温或 4℃ 下反应数小时。
调整摩尔比以控制染料标记密度，避免过度修饰影响蛋白结构与生物活性。
反应终止与纯化
反应完成后，通过透析、凝胶过滤或高效液相色谱（HPLC）去除未反应的 CY5.5。
收集纯化后的 CY5.5-Insulin，检测荧光强度及蛋白浓度，评估标记效率。
特性验证
检测激发/发射光谱，确认荧光性能。
通过 SDS-PAGE 或质谱分析验证蛋白结构完整性和标记位点。
通过上述步骤，CY5.5-Insulin 保留了胰岛素的三维构象及生物活性，同时具备近红外荧光追踪功能，可用于体外和体内实验研究。
产品名称：CY5.5-Insulin，花菁染料CY5.5标记胰岛素
纯度：95%+
规格：mg/g
用途：科研

状态：固体/粉末/溶液

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仅用于科研，不能用于人体。小编axc