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Cy5-Puerarin,花菁染料CY5标记葛根素的反应步骤

时间:2025-09-19 11:53:45       浏览:82
Cy5-Puerarin,花菁染料CY5标记葛根素的反应步骤
CY5-Puerarin(Cyanine5-Puerarin)是将花菁染料Cy5与葛根素(Puerarin)偶联形成的荧光标记异黄酮分子。葛根素是一种异黄酮类化合物,具有良好的水溶性和生物活性,可参与、血管舒张及药物递送研究。CY5标记赋予其近红外荧光(激发约650 nm,发射约670 nm),便于体外及体内追踪和分析。
反应步骤
葛根素前处理
葛根素分子中存在酚羟基,可通过短链羧酸活化或醛基衍生物进行偶联。
根据实验设计,可将葛根素羟基部分进行保护,避免非特异性反应。
Cy5活化
Cy5通常以NHS酯或马来酰亚胺形式存在,便于与羟基或氨基反应。
活化的Cy5在有机溶剂(如DMSO、DMF)中溶解,准备偶联反应。
偶联反应
在适宜缓冲液(pH 7–8)中,将活化的Cy5缓慢加入葛根素溶液,保持轻微搅拌。
反应温和(室温或37℃),通常持续数小时至过夜,以保证偶联效率。
形成稳定的酯或酰胺键,将Cy5牢固结合到葛根素分子上。
纯化步骤
通过透析、凝胶过滤或高效液相色谱(HPLC)去除未反应的Cy5和小分子杂质。
分析纯化产物的荧光特性和分子量,确保结构完整性。
表征
质谱确认分子量,UV-Vis吸收和荧光光谱测定光学特性。
荧光稳定性测试确保近红外标记在水溶液及生理条件下不降解。
产品名称:Cy5-Puerarin,花菁染料CY5标记葛根素
纯度:95%+
规格:mg/g
用途:科研

状态:固体/粉末/溶液


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