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CY5-Taurocholic acid,花菁染料CY5标记牛黄胆酸的合成步骤概述

时间:2025-09-22 14:05:50       浏览:72
CY5-Taurocholic acid,花菁染料CY5标记牛黄胆酸的合成步骤概述
牛黄胆酸(Taurocholic Acid, TCA)是一种结合胆酸,其分子中含有羧酸末端及氨基酸衍生的氨基功能基团,具有亲水性和生物活性。通过与Cy5染料偶联形成Cy5-Taurocholic Acid,可在保留胆酸功能的同时赋予分子荧光特性,用于生物成像、分子追踪及药物载体研究。其合成步骤主要包括活化、偶联、纯化及表征。
合成步骤概述:
活化胆酸羧基:
牛黄胆酸的羧酸末端需通过化学活化,常用方法是使用EDC(1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺)与NHS(N-羟基琥珀酰亚胺)生成活性酯。
该活性酯中羰基碳对亲核试剂具有高反应性,为后续偶联提供基础。
荧光偶联:
将活化的牛黄胆酸与Cy5-NH₂衍生物反应,氨基对羧酸活性酯发生亲核攻击,形成稳定酰胺键。
反应通常在弱碱性缓冲液或有机溶剂(如DMF或DMSO)中进行,温和条件可保持Cy5共轭体系和胆酸分子活性。
偶联条件控制:
为保证标记效率,反应摩尔比需优化,通常采用微量过量的Cy5-NH₂以确保胆酸羧基充分反应。
避光操作、防止氧化和热降解是保证产物荧光稳定性的重要环节。
纯化步骤:
反应结束后,通过透析去除小分子未反应Cy5和盐离子。
可进一步采用凝胶过滤色谱(GFC)或高效液相色谱(HPLC)提高产物纯度,分离偶联产物与未偶联牛黄胆酸。
表征验证:
通过紫外-可见光谱(UV-Vis)确认Cy5吸收峰和胆酸吸收特征。
荧光光谱检测发射峰及信号强度,评估偶联成功率。
质谱(MS)分析产物分子量,验证酰胺键形成与偶联数量。
产品名称:CY5-Taurocholic acid,花菁染料CY5标记牛黄胆酸的
纯度:95%+
规格:mg/g
用途:科研

状态:固体/粉末/溶液


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仅用于科研,不能用于人体。小编axc
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